CAJ | 학술논문

通过对拟南芥ATH1基因芯片数据的分析, 从拟南芥中鉴定到一个受干旱胁迫高水平诱导的cDNA片段, 并用RACE方法获得了其全长cDNA. PCR及定量实时PCR分析表明, 该基因在经干旱、紫外线照射、脱落酸、高盐以及水杨酸等胁迫条件处理后表达量均有显著提高, 特别是干旱处理后短时间内表达量迅速提高, 3 h后即提高到对照样品的430多倍. 通过多序列比对和系统进化分析, 我们将该基因归于DREB亚家族. 由于该基因编码蛋白含有典型的AP2/EREBP DNA结合结构域, 并在N端有一段富含谷氨酰氨残基的区域, 所以将它命名为QRAP2 (Glutamine-rich AP2). 凝胶阻滞实验结果显示, QRAP2蛋白能够特异结合DRE顺式元件序列但不能与mDRE和GCC等非相关元件结合. 酵母单杂交实验表明, QRAP2蛋白全长序列或其N端112个氨基酸与GAL4 DNA结合结构域形成的融合蛋白表现出转录激活功能, 而其C端135个氨基酸与GAL4 DNA结合结构域的融合蛋白则没有表现出转录激活活性. 现有资料的分析表明, QRAP2是AP2/EREBP转录因子家族的新成员, 可能在干旱胁迫条件下参与激活相关下游基因的表达.
통과대의남개ATH1기인심편수거적분석, 종의남개중감정도일개수간한협박고수평유도적cDNA편단, 병용RACE방법획득료기전장cDNA. PCR급정량실시PCR분석표명, 해기인재경간한、자외선조사、탈락산、고염이급수양산등협박조건처리후표체량균유현저제고, 특별시간한처리후단시간내표체량신속제고, 3 h후즉제고도대조양품적430다배. 통과다서렬비대화계통진화분석, 아문장해기인귀우DREB아가족. 유우해기인편마단백함유전형적AP2/EREBP DNA결합결구역, 병재N단유일단부함곡안선안잔기적구역, 소이장타명명위QRAP2 (Glutamine-rich AP2). 응효조체실험결과현시, QRAP2단백능구특이결합DRE순식원건서렬단불능여mDRE화GCC등비상관원건결합. 효모단잡교실험표명, QRAP2단백전장서렬혹기N단112개안기산여GAL4 DNA결합결구역형성적융합단백표현출전록격활공능, 이기C단135개안기산여GAL4 DNA결합결구역적융합단백칙몰유표현출전록격활활성. 현유자료적분석표명, QRAP2시AP2/EREBP전록인자가족적신성원, 가능재간한협박조건하삼여격활상관하유기인적표체.