眼科新进展
眼科新進展
안과신진전
RECENT ADVANCES IN OPHTHALMOLOGY
2006年
12期
896-899
,共4页
王亚冬%吴金道%德伟%王学浩%卞春及%刘超%童明庆
王亞鼕%吳金道%德偉%王學浩%卞春及%劉超%童明慶
왕아동%오금도%덕위%왕학호%변춘급%류초%동명경
视网膜%蛋白质组%双向电泳%大鼠
視網膜%蛋白質組%雙嚮電泳%大鼠
시망막%단백질조%쌍향전영%대서
目的 建立优化SD大鼠神经视网膜双向电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)图像技术方法,并对正常视网膜蛋白质组图像进行初步分析.方法 雄性SD大鼠,断颈处死取眼球.在解剖显微镜下分离神经视网膜组织,液氮速冻,提取总蛋白质组份,-70 ℃保存.部分视网膜标本立即固定后做光镜或电镜分析.应用2-DE技术,对提取的蛋白质进行分离.在一维等点聚焦、垂直SDS凝胶电泳、银染(考染)等关键技术上进行优化和重复实验,建立分辨率高和重复性良好的2-DE图像;联合图像扫描和图像分析软件,对正常SD大鼠神经视网膜组织蛋白质组图像进行初步分析.结果 成功获得了分辨率和重复性良好的视网膜蛋白质2-DE图谱.每张电泳图谱可获得约3 000个左右可辨认的蛋白质斑点.其中大部分蛋白质点分布在pH4～8范围内,其相对分子质量主要集中在25～100区域.结论 2-DE技术可用于对神经视网膜蛋白质组份的分离和鉴定.本实验建立的技术为进一步进行视网膜蛋白质组学研究奠定了基础.
目的 建立優化SD大鼠神經視網膜雙嚮電泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)圖像技術方法,併對正常視網膜蛋白質組圖像進行初步分析.方法 雄性SD大鼠,斷頸處死取眼毬.在解剖顯微鏡下分離神經視網膜組織,液氮速凍,提取總蛋白質組份,-70 ℃保存.部分視網膜標本立即固定後做光鏡或電鏡分析.應用2-DE技術,對提取的蛋白質進行分離.在一維等點聚焦、垂直SDS凝膠電泳、銀染(攷染)等關鍵技術上進行優化和重複實驗,建立分辨率高和重複性良好的2-DE圖像;聯閤圖像掃描和圖像分析軟件,對正常SD大鼠神經視網膜組織蛋白質組圖像進行初步分析.結果 成功穫得瞭分辨率和重複性良好的視網膜蛋白質2-DE圖譜.每張電泳圖譜可穫得約3 000箇左右可辨認的蛋白質斑點.其中大部分蛋白質點分佈在pH4～8範圍內,其相對分子質量主要集中在25～100區域.結論 2-DE技術可用于對神經視網膜蛋白質組份的分離和鑒定.本實驗建立的技術為進一步進行視網膜蛋白質組學研究奠定瞭基礎.
목적 건립우화SD대서신경시망막쌍향전영(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)도상기술방법,병대정상시망막단백질조도상진행초보분석.방법 웅성SD대서,단경처사취안구.재해부현미경하분리신경시망막조직,액담속동,제취총단백질조빈,-70 ℃보존.부분시망막표본립즉고정후주광경혹전경분석.응용2-DE기술,대제취적단백질진행분리.재일유등점취초、수직SDS응효전영、은염(고염)등관건기술상진행우화화중복실험,건립분변솔고화중복성량호적2-DE도상;연합도상소묘화도상분석연건,대정상SD대서신경시망막조직단백질조도상진행초보분석.결과 성공획득료분변솔화중복성량호적시망막단백질2-DE도보.매장전영도보가획득약3 000개좌우가변인적단백질반점.기중대부분단백질점분포재pH4～8범위내,기상대분자질량주요집중재25～100구역.결론 2-DE기술가용우대신경시망막단백질조빈적분리화감정.본실험건립적기술위진일보진행시망막단백질조학연구전정료기출.
