中国药物与临床
中國藥物與臨床
중국약물여림상
CHINESE REMEDIES & CLINICS
2008年
3期
174-176
,共3页
杜丽川%郝建宇%黄秉仁%崔迎宾
杜麗川%郝建宇%黃秉仁%崔迎賓
두려천%학건우%황병인%최영빈
白细胞介素类%原核表达%HIS-GST-IL-24融合蛋白%人胰腺癌细胞
白細胞介素類%原覈錶達%HIS-GST-IL-24融閤蛋白%人胰腺癌細胞
백세포개소류%원핵표체%HIS-GST-IL-24융합단백%인이선암세포
目的 构建人白细胞介素24(IL-24)基因的表达载体并在大肠杆菌中诱导表达,观察纯化后的IL-24融合蛋白导致人胰腺癌细胞(Pane-1)生长抑制的作用.方法 用限制性内切酶从质粒pET30b-II-24中酶切获取人IL-24 cDNA片段.并将该片段与pET42a原核表达载体基因重组,在大肠杆菌中实现重组基因的表达,提取并纯化rhIL-24蛋白.用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)和Western blot对表达产物进行鉴定.以不同浓度的重组蛋白IL-24与胰腺癌细胞Panc-1、正常肝胚细胞CCC-HEI,-1共培养48 h,同时设立相应浓度梯度的HIS-GST融合蛋白组对照组.采用四甲基偶氮唑蓝(MTY)法检测各组细胞的生长抑制情况.结果 酶切结果 证实,成功构建了pET42a-IL24原核表达载体,并在大肠杆菌中获得稳定的表达.rhIL-24蛋白以浓度依赖性的关系抑制Panc-1细胞的生长,抑制率明显高于HIS-GST蛋白.结论 rhIL-24蛋白对胰腺癌细胞Panc-1生长有抑制作用.
目的 構建人白細胞介素24(IL-24)基因的錶達載體併在大腸桿菌中誘導錶達,觀察純化後的IL-24融閤蛋白導緻人胰腺癌細胞(Pane-1)生長抑製的作用.方法 用限製性內切酶從質粒pET30b-II-24中酶切穫取人IL-24 cDNA片段.併將該片段與pET42a原覈錶達載體基因重組,在大腸桿菌中實現重組基因的錶達,提取併純化rhIL-24蛋白.用十二烷基磺痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS-PAGE)和Western blot對錶達產物進行鑒定.以不同濃度的重組蛋白IL-24與胰腺癌細胞Panc-1、正常肝胚細胞CCC-HEI,-1共培養48 h,同時設立相應濃度梯度的HIS-GST融閤蛋白組對照組.採用四甲基偶氮唑藍(MTY)法檢測各組細胞的生長抑製情況.結果 酶切結果 證實,成功構建瞭pET42a-IL24原覈錶達載體,併在大腸桿菌中穫得穩定的錶達.rhIL-24蛋白以濃度依賴性的關繫抑製Panc-1細胞的生長,抑製率明顯高于HIS-GST蛋白.結論 rhIL-24蛋白對胰腺癌細胞Panc-1生長有抑製作用.
목적 구건인백세포개소24(IL-24)기인적표체재체병재대장간균중유도표체,관찰순화후적IL-24융합단백도치인이선암세포(Pane-1)생장억제적작용.방법 용한제성내절매종질립pET30b-II-24중매절획취인IL-24 cDNA편단.병장해편단여pET42a원핵표체재체기인중조,재대장간균중실현중조기인적표체,제취병순화rhIL-24단백.용십이완기광산납-취병희선알응효전영법(SDS-PAGE)화Western blot대표체산물진행감정.이불동농도적중조단백IL-24여이선암세포Panc-1、정상간배세포CCC-HEI,-1공배양48 h,동시설립상응농도제도적HIS-GST융합단백조대조조.채용사갑기우담서람(MTY)법검측각조세포적생장억제정황.결과 매절결과 증실,성공구건료pET42a-IL24원핵표체재체,병재대장간균중획득은정적표체.rhIL-24단백이농도의뢰성적관계억제Panc-1세포적생장,억제솔명현고우HIS-GST단백.결론 rhIL-24단백대이선암세포Panc-1생장유억제작용.
