CAJ | 학술논문

程序性细胞死亡因子4(PDCD4)是一种新的抑癌基因,在肿瘤的发生、发展、治疗和预后中起重要作用.目的:探讨PDCD4 RNA干扰对胃癌细胞株MKN28凋亡的影响及其调控机制.方法:设计PDCD4短发夹RNA(shRNA)干扰序列,构建干扰质粒并转染MKN28细胞,设立阴性对照组和空白对照组.以蛋白质印迹法检测PDCD4和凋亡相关蛋白FLIP、Caspase-8和Cleaved-Caspase-8的表达,以Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡.结果:PDCD4 shRNA干扰质粒转染MKN28细胞后,获得稳定低表达PDCD4的细胞模型.干扰效率为86%.与阴性对照组和空白对照组相比,干扰组PDCD4蛋白表达显著降低(0.11±0.01对0.86±0.18和0.81±0.12.P<0.01),MKN28细胞凋亡率亦显著降低(7.13%±0.86%对13.16%±2.35%和12.02%±2.11%,P<0.05).与空白对照组相比,干扰组FLIP表达显著增高(1.25±0.34对0.63±0.11,P<0.01),而Caspase-8和Cleaved-Caspase-8表达显著降低(0.26±0.08对0.76+0.12,0.11±0.03对0.36±0.09,P<0.01).结论:干扰PDCD4表达可抑制胃癌细胞MKN28的凋亡,且这种抑制作用可能是由于干扰PDCD4促进抗凋亡蛋白FLIP的表达,从而抑制Caspase-8的活性引起的.
정서성세포사망인자4(PDCD4)시일충신적억암기인,재종류적발생、발전、치료화예후중기중요작용.목적:탐토PDCD4 RNA간우대위암세포주MKN28조망적영향급기조공궤제.방법:설계PDCD4단발협RNA(shRNA)간우서렬,구건간우질립병전염MKN28세포,설립음성대조조화공백대조조.이단백질인적법검측PDCD4화조망상관단백FLIP、Caspase-8화Cleaved-Caspase-8적표체,이Annexin V-FITC/PI쌍염법검측세포조망.결과:PDCD4 shRNA간우질립전염MKN28세포후,획득은정저표체PDCD4적세포모형.간우효솔위86%.여음성대조조화공백대조조상비,간우조PDCD4단백표체현저강저(0.11±0.01대0.86±0.18화0.81±0.12.P<0.01),MKN28세포조망솔역현저강저(7.13%±0.86%대13.16%±2.35%화12.02%±2.11%,P<0.05).여공백대조조상비,간우조FLIP표체현저증고(1.25±0.34대0.63±0.11,P<0.01),이Caspase-8화Cleaved-Caspase-8표체현저강저(0.26±0.08대0.76+0.12,0.11±0.03대0.36±0.09,P<0.01).결론:간우PDCD4표체가억제위암세포MKN28적조망,차저충억제작용가능시유우간우PDCD4촉진항조망단백FLIP적표체,종이억제Caspase-8적활성인기적.