中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2010年
5期
660-665
,共6页
严子才%徐克%李红%戴旭%任克%冯博%郭敏
嚴子纔%徐剋%李紅%戴旭%任剋%馮博%郭敏
엄자재%서극%리홍%대욱%임극%풍박%곽민
骨髓基质干细胞%移植%血管内%股骨头缺血性坏死%模型%成骨作用%成血管作用
骨髓基質榦細胞%移植%血管內%股骨頭缺血性壞死%模型%成骨作用%成血管作用
골수기질간세포%이식%혈관내%고골두결혈성배사%모형%성골작용%성혈관작용
目的 评估在激素性股骨头坏死模型中血管内移植骨髓基质干细胞(MSCs)的成骨及成血管作用.方法 日本大耳白兔20只,雌雄不限,体重2.9±0.7 kg,从兔耳缘静脉内注射马血清2 mL,从第二天起于臀肌注射甲强龙(4 mg/kg),前两周每周2次,以后每周1次,共6周.造模结束后死去5只兔子,剩下15只随机分成两组,8只行右侧髂总动脉MSCs移植,作为移植组,其他7只不移植MSCs,作为对照组.从20天龄的日本大耳白兔的骨髓中提取MSCs,贴壁培养法分离、培养、传代MSCs,用BrdU标记第三代MSCs.将MSCs移植入造模组的右侧髂总动脉,5周后取左右两侧股骨头、颈部肌肉,行免疫组化BrdU和CD34双标记检测及冰冻切片免疫荧光双标记检测.并取双侧股骨头, 10%甲醛固定,EDTA脱钙,切片行免疫组化BMP-2、BrdU双标记检测,并行HE染色以观察骨质变化.结果 移植组股骨头、颈部周围肌肉组织BrdU、CD34双染色显示,该处肌肉组织中有大量BrdU阳性细胞,其中一部分胞浆CD34阳性,表明移植的一部分MSCs在股骨头颈部周围肌肉组织中向血管内皮细胞方向转化.冰冻切片BrdU-Cy3、CD34-FITC免疫双荧光也显示同样的结果.MSCs移植组骨陷窝中可见BrdU阳性细胞,其胞浆中有BMP-2的表达,而对照组见大量空骨陷窝,BMP-2较少表达或不表达.HE染色也显示,对照组骨陷窝内细胞核明显萎缩,接近空骨陷窝,哈弗氏管内细胞大量减少,而移植组的骨陷窝内细胞核较对照组组明显增大,哈弗氏管内细胞明显增加,但仍低于未造模未移植MSCs的正常兔子;未造模未移植的正常兔子的骨陷窝内细胞数量多,细胞核饱满,哈弗氏管内细胞多,核深染,活力正常.结论 在股骨头供血血管内移植骨髓基质干细胞在局部肌肉组织中可向血管内皮细胞方向转化,在骨组织中可向成骨细胞方向转化,血管内移植骨髓基质干细胞有助于骨坏死的修复.
目的 評估在激素性股骨頭壞死模型中血管內移植骨髓基質榦細胞(MSCs)的成骨及成血管作用.方法 日本大耳白兔20隻,雌雄不限,體重2.9±0.7 kg,從兔耳緣靜脈內註射馬血清2 mL,從第二天起于臀肌註射甲彊龍(4 mg/kg),前兩週每週2次,以後每週1次,共6週.造模結束後死去5隻兔子,剩下15隻隨機分成兩組,8隻行右側髂總動脈MSCs移植,作為移植組,其他7隻不移植MSCs,作為對照組.從20天齡的日本大耳白兔的骨髓中提取MSCs,貼壁培養法分離、培養、傳代MSCs,用BrdU標記第三代MSCs.將MSCs移植入造模組的右側髂總動脈,5週後取左右兩側股骨頭、頸部肌肉,行免疫組化BrdU和CD34雙標記檢測及冰凍切片免疫熒光雙標記檢測.併取雙側股骨頭, 10%甲醛固定,EDTA脫鈣,切片行免疫組化BMP-2、BrdU雙標記檢測,併行HE染色以觀察骨質變化.結果 移植組股骨頭、頸部週圍肌肉組織BrdU、CD34雙染色顯示,該處肌肉組織中有大量BrdU暘性細胞,其中一部分胞漿CD34暘性,錶明移植的一部分MSCs在股骨頭頸部週圍肌肉組織中嚮血管內皮細胞方嚮轉化.冰凍切片BrdU-Cy3、CD34-FITC免疫雙熒光也顯示同樣的結果.MSCs移植組骨陷窩中可見BrdU暘性細胞,其胞漿中有BMP-2的錶達,而對照組見大量空骨陷窩,BMP-2較少錶達或不錶達.HE染色也顯示,對照組骨陷窩內細胞覈明顯萎縮,接近空骨陷窩,哈弗氏管內細胞大量減少,而移植組的骨陷窩內細胞覈較對照組組明顯增大,哈弗氏管內細胞明顯增加,但仍低于未造模未移植MSCs的正常兔子;未造模未移植的正常兔子的骨陷窩內細胞數量多,細胞覈飽滿,哈弗氏管內細胞多,覈深染,活力正常.結論 在股骨頭供血血管內移植骨髓基質榦細胞在跼部肌肉組織中可嚮血管內皮細胞方嚮轉化,在骨組織中可嚮成骨細胞方嚮轉化,血管內移植骨髓基質榦細胞有助于骨壞死的脩複.
목적 평고재격소성고골두배사모형중혈관내이식골수기질간세포(MSCs)적성골급성혈관작용.방법 일본대이백토20지,자웅불한,체중2.9±0.7 kg,종토이연정맥내주사마혈청2 mL,종제이천기우둔기주사갑강룡(4 mg/kg),전량주매주2차,이후매주1차,공6주.조모결속후사거5지토자,잉하15지수궤분성량조,8지행우측가총동맥MSCs이식,작위이식조,기타7지불이식MSCs,작위대조조.종20천령적일본대이백토적골수중제취MSCs,첩벽배양법분리、배양、전대MSCs,용BrdU표기제삼대MSCs.장MSCs이식입조모조적우측가총동맥,5주후취좌우량측고골두、경부기육,행면역조화BrdU화CD34쌍표기검측급빙동절편면역형광쌍표기검측.병취쌍측고골두, 10%갑철고정,EDTA탈개,절편행면역조화BMP-2、BrdU쌍표기검측,병행HE염색이관찰골질변화.결과 이식조고골두、경부주위기육조직BrdU、CD34쌍염색현시,해처기육조직중유대량BrdU양성세포,기중일부분포장CD34양성,표명이식적일부분MSCs재고골두경부주위기육조직중향혈관내피세포방향전화.빙동절편BrdU-Cy3、CD34-FITC면역쌍형광야현시동양적결과.MSCs이식조골함와중가견BrdU양성세포,기포장중유BMP-2적표체,이대조조견대량공골함와,BMP-2교소표체혹불표체.HE염색야현시,대조조골함와내세포핵명현위축,접근공골함와,합불씨관내세포대량감소,이이식조적골함와내세포핵교대조조조명현증대,합불씨관내세포명현증가,단잉저우미조모미이식MSCs적정상토자;미조모미이식적정상토자적골함와내세포수량다,세포핵포만,합불씨관내세포다,핵심염,활력정상.결론 재고골두공혈혈관내이식골수기질간세포재국부기육조직중가향혈관내피세포방향전화,재골조직중가향성골세포방향전화,혈관내이식골수기질간세포유조우골배사적수복.
