CAJ | 학술논문

[目的]利用现代分子生物学技术探索蜡梅(Chimonanthus praecax)资源的药用价值.[方法]在有关蜡梅生物学特性研究基础上,构建蜡梅非特异性脂转移蛋白(nsLTP)基因家族4个成员(GenBmnk登录号:FJ889521、FJ904082、FJ904083、FJ904084)的原核表达载体CpLTP1-pET、CpLTP2-pET、CpLTP3-pET、CpLTP4-pET,并对诱导温度、IPTG浓度和诱导表达时间等条件进行了优化.[结果]在1.0mmol/L IPTG、37℃常规诱导条件下诱导6h可获得高效表达,总表达产率可达到细菌全蛋白质总量的50%以上,包涵体表达远高于可溶性蛋白的表达;在0.5 mmoL/L IPTG、28 oC条件下诱导6h能够获得较好的可溶性表达,利用His-Bind蛋白纯化回收试剂盒获得4个纯化的重组蛋白.[结论]成功构建蜡梅nsLTP的原核表达栽体,转化大肠杆菌Origami2(DE3)获得4个纯化的重组蛋白,可为后续的抗菌抗病毒活性研究提供研究材料,并为蜡梅资源药用价值的开发提供研究思路.
[목적]이용현대분자생물학기술탐색사매(Chimonanthus praecax)자원적약용개치.[방법]재유관사매생물학특성연구기출상,구건사매비특이성지전이단백(nsLTP)기인가족4개성원(GenBmnk등록호:FJ889521、FJ904082、FJ904083、FJ904084)적원핵표체재체CpLTP1-pET、CpLTP2-pET、CpLTP3-pET、CpLTP4-pET,병대유도온도、IPTG농도화유도표체시간등조건진행료우화.[결과]재1.0mmol/L IPTG、37℃상규유도조건하유도6h가획득고효표체,총표체산솔가체도세균전단백질총량적50%이상,포함체표체원고우가용성단백적표체;재0.5 mmoL/L IPTG、28 oC조건하유도6h능구획득교호적가용성표체,이용His-Bind단백순화회수시제합획득4개순화적중조단백.[결론]성공구건사매nsLTP적원핵표체재체,전화대장간균Origami2(DE3)획득4개순화적중조단백,가위후속적항균항병독활성연구제공연구재료,병위사매자원약용개치적개발제공연구사로.