CAJ | 학술논문

目的建立人外周血自然杀伤T细胞(NKT)体外扩增及检测NKT细胞所分泌的细胞因子的方法.方法分别采用单加α半乳糖神经酰胺(α-Galcer组),单加树突状细胞(DC组)以及同时加α-Galcer、DC(α-Galcer、DC组)的方法从人外周血单个核细胞(PBMC)和纯化T淋巴细胞中扩增TCRVα24+/TCRVβ11+NKT细胞.采用细胞内细胞因子流式细胞术检测手段测定NKT细胞中IL-4,IFN-γ、TNF-α阳性细胞比例.结果PBMC中的α-Galcer组,DC、α-Galcer组和纯化T淋巴细胞中的DC、α-Galcer组,NKT细胞扩增19d后分别占淋巴细胞的(25.5±7.2)%、(18.2±8.2)%和(24.8±5.5)%,NKT细胞分别扩增了(15.1±9.1)×103倍、(21.8±17.3)×103倍和(23.O±1 6.7)×103倍,与其它各组差异有显著性意义(P＜O.01).扩增过程TCRVβ11+NKT细胞中分泌IL-4,IFN-γ和TNF α的细胞比例均高于TCRVβ11-T淋巴细胞(P＜O.05).结论α-Galcer具有体外大量扩增NKT细胞的能力,同时α-Galcer的激活能力受CD1d分子的限制.由于PBMC中的单核系细胞也表达CD1d分子,因此直接从PBMC扩增NKT也能获得良好的效果.
목적건립인외주혈자연살상T세포(NKT)체외확증급검측NKT세포소분비적세포인자적방법.방법분별채용단가α반유당신경선알(α-Galcer조),단가수돌상세포(DC조)이급동시가α-Galcer、DC(α-Galcer、DC조)적방법종인외주혈단개핵세포(PBMC)화순화T림파세포중확증TCRVα24+/TCRVβ11+NKT세포.채용세포내세포인자류식세포술검측수단측정NKT세포중IL-4,IFN-γ、TNF-α양성세포비례.결과PBMC중적α-Galcer조,DC、α-Galcer조화순화T림파세포중적DC、α-Galcer조,NKT세포확증19d후분별점림파세포적(25.5±7.2)%、(18.2±8.2)%화(24.8±5.5)%,NKT세포분별확증료(15.1±9.1)×103배、(21.8±17.3)×103배화(23.O±1 6.7)×103배,여기타각조차이유현저성의의(P＜O.01).확증과정TCRVβ11+NKT세포중분비IL-4,IFN-γ화TNF α적세포비례균고우TCRVβ11-T림파세포(P＜O.05).결론α-Galcer구유체외대량확증NKT세포적능력,동시α-Galcer적격활능력수CD1d분자적한제.유우PBMC중적단핵계세포야표체CD1d분자,인차직접종PBMC확증NKT야능획득량호적효과.