中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2004年
3期
136-138
,共3页
陈勇%韦罗生%成彩莲%夏瑞明%刘峡%龚太平%邱惠
陳勇%韋囉生%成綵蓮%夏瑞明%劉峽%龔太平%邱惠
진용%위라생%성채련%하서명%류협%공태평%구혜
小鼠白细胞介素-18%T7启动子%原核表达
小鼠白細胞介素-18%T7啟動子%原覈錶達
소서백세포개소-18%T7계동자%원핵표체
目的克隆小鼠白细胞介素-18(mIL-18)全长cDNA,并使其在大肠杆菌中表达.方法利用RT-PCR和巢式-PCR,从活化小鼠腹腔巨噬细胞中扩增成熟IL-18的全长cDNA.经双酶切,将该cDNA片断插入表达载体pRSET-C,构建含T7启动子的原核表达载体pRSET-mIL-18.测序鉴定后,将重组体转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG和/或乳糖的诱导下,使重组质粒获得表达.结果重组质粒读码框及mIL-18的序列与预期一致,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析获得证实.结论已成功构建了原核表达载体pRSET-mIL-18,并使其在大肠杆菌中获得了融合表达.
目的剋隆小鼠白細胞介素-18(mIL-18)全長cDNA,併使其在大腸桿菌中錶達.方法利用RT-PCR和巢式-PCR,從活化小鼠腹腔巨噬細胞中擴增成熟IL-18的全長cDNA.經雙酶切,將該cDNA片斷插入錶達載體pRSET-C,構建含T7啟動子的原覈錶達載體pRSET-mIL-18.測序鑒定後,將重組體轉化大腸桿菌BL21(DE3),在IPTG和/或乳糖的誘導下,使重組質粒穫得錶達.結果重組質粒讀碼框及mIL-18的序列與預期一緻,錶達產物經SDS-PAGE和Western blot分析穫得證實.結論已成功構建瞭原覈錶達載體pRSET-mIL-18,併使其在大腸桿菌中穫得瞭融閤錶達.
목적극륭소서백세포개소-18(mIL-18)전장cDNA,병사기재대장간균중표체.방법이용RT-PCR화소식-PCR,종활화소서복강거서세포중확증성숙IL-18적전장cDNA.경쌍매절,장해cDNA편단삽입표체재체pRSET-C,구건함T7계동자적원핵표체재체pRSET-mIL-18.측서감정후,장중조체전화대장간균BL21(DE3),재IPTG화/혹유당적유도하,사중조질립획득표체.결과중조질립독마광급mIL-18적서렬여예기일치,표체산물경SDS-PAGE화Western blot분석획득증실.결론이성공구건료원핵표체재체pRSET-mIL-18,병사기재대장간균중획득료융합표체.
