CAJ | 학술논문

按照犬瘟热(CDV)N基因序列,设计合成了特异性引物和探针,经各反应条件的优化,建立了Real-time荧光定量RT-PCR技术,对细胞培养物、肝脏、肺脏、脑、脾脏、淋巴结以及鼻腔拭子等组织病料中的CDV进行了特异性检测和敏感性试验.同时,利用建立的Real-time荧光定量RT-PCR方法与常规RT-PCR以及韩国BIOINDIST生产的BIT RAPID CDV检测试剂盒对57份临床样品进行了检测.结果:用20p mol/mL的引物浓度各1 uL和20 pmol/mL的探针浓度0.3 uL,获得的荧光信号最强,曲线平滑.敏感性高,可检测到1.24×10-3 ng/uL的病毒RNA;特异性强,与NDV、AⅣ、NiPV等RNA病毒不发生交叉反应.试验重复性的变异系数(CV)分别为2.3%、2.5%和4.2%;与常规RT-PCR和BIOINDIST生产的BIT RAPID CDV检测试剂盒相比较,该方法具有快速、特异、敏感、可定量,并可同时检测大量样品等优点.
안조견온열(CDV)N기인서렬,설계합성료특이성인물화탐침,경각반응조건적우화,건립료Real-time형광정량RT-PCR기술,대세포배양물、간장、폐장、뇌、비장、림파결이급비강식자등조직병료중적CDV진행료특이성검측화민감성시험.동시,이용건립적Real-time형광정량RT-PCR방법여상규RT-PCR이급한국BIOINDIST생산적BIT RAPID CDV검측시제합대57빈림상양품진행료검측.결과:용20p mol/mL적인물농도각1 uL화20 pmol/mL적탐침농도0.3 uL,획득적형광신호최강,곡선평활.민감성고,가검측도1.24×10-3 ng/uL적병독RNA;특이성강,여NDV、AⅣ、NiPV등RNA병독불발생교차반응.시험중복성적변이계수(CV)분별위2.3%、2.5%화4.2%;여상규RT-PCR화BIOINDIST생산적BIT RAPID CDV검측시제합상비교,해방법구유쾌속、특이、민감、가정량,병가동시검측대량양품등우점.