生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2007年
3期
15-17
,共3页
赵邑%齐延红%潘薇薇%卢晓霞%刘彦萍%赵峰梅
趙邑%齊延紅%潘薇薇%盧曉霞%劉彥萍%趙峰梅
조읍%제연홍%반미미%로효하%류언평%조봉매
重组人组织因子%基因克隆%大肠杆菌%分泌表达
重組人組織因子%基因剋隆%大腸桿菌%分泌錶達
중조인조직인자%기인극륭%대장간균%분비표체
目的:构建含有TF的胞外区和跨膜区基因的phoA一TF243分泌型表达载体,在大肠杆菌中以可溶形式表达重组人组织因子(rhTF243).方法:从人胎盘组织中提取总RNA,以RT-PCR扩增获得目的基因,并克隆到phoA载体中,在大肠肝菌MM294中表达rhTF243,产物采用免疫亲合层析进行纯化.结果:通过低磷酸盐诱导工程菌,获得重组人组织因子(rhTF243),表达水平占菌体总蛋白量的16.3%,经免疫亲合层析纯化,产物纯度达到95%以上,,分子量为27.4kD.结论:获得了rhTF243,具有与完整分子完全相同的凝血功能.
目的:構建含有TF的胞外區和跨膜區基因的phoA一TF243分泌型錶達載體,在大腸桿菌中以可溶形式錶達重組人組織因子(rhTF243).方法:從人胎盤組織中提取總RNA,以RT-PCR擴增穫得目的基因,併剋隆到phoA載體中,在大腸肝菌MM294中錶達rhTF243,產物採用免疫親閤層析進行純化.結果:通過低燐痠鹽誘導工程菌,穫得重組人組織因子(rhTF243),錶達水平佔菌體總蛋白量的16.3%,經免疫親閤層析純化,產物純度達到95%以上,,分子量為27.4kD.結論:穫得瞭rhTF243,具有與完整分子完全相同的凝血功能.
목적:구건함유TF적포외구화과막구기인적phoA일TF243분비형표체재체,재대장간균중이가용형식표체중조인조직인자(rhTF243).방법:종인태반조직중제취총RNA,이RT-PCR확증획득목적기인,병극륭도phoA재체중,재대장간균MM294중표체rhTF243,산물채용면역친합층석진행순화.결과:통과저린산염유도공정균,획득중조인조직인자(rhTF243),표체수평점균체총단백량적16.3%,경면역친합층석순화,산물순도체도95%이상,,분자량위27.4kD.결론:획득료rhTF243,구유여완정분자완전상동적응혈공능.
