CAJ | 학술논문

目的:应用光学成像方法检测HSV-tk/GCV自杀基因系统与重组改造的人肿瘤坏死因子(recombinant human tumor necrosis factor,rmhTNF)的联合使用,对人涎腺腺样囊性癌细胞(adenoid cystic carcinoma,ACC-M)的杀伤效率.方法:实验分为四组,细胞模型对照组、单纯HSV-tk/GCV自杀基因系统治疗组、rmhTNF处理组、自杀基因联合rmhTNF治疗组.将稳定表达胸苷激酶-绿色荧光蛋白(thymidine kinase-green fluorescen protenin,tk-GFP)的ACC-M细胞(ACC-M-tk-GFP)按5 000个/孔接种到96孔板中,24 h后给药治疗;分别于加药前、给药后6 h、给药后24 h进行荧光成像.检测绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的荧光用于准确显示胸苷激酶(tk)基因表达的肿瘤细胞,检测碘化丙啶(propidium iodide,PI)的荧光用于显示死亡的肿瘤细胞.通过细胞的透射图及其PI和GFP荧光图像,分别计算tk+细胞和tk-细胞的死亡率.结果:HSV-tk/GCV自杀基因系统与rmhTNF联合治疗组的细胞在加药后6 h就已经出现细胞死亡迹象,而单纯HSV-tk/GCV自杀基因系统治疗组的细胞在加更昔洛韦(ganciclovir,GCV)后24 h才出现细胞死亡,单纯rmhTNF治疗组在加药后24 h还没有细胞死亡发生.对于给药后24 h的tk+细胞死亡率,联合治疗组(85.88%)明显高于GCV(38.13%)和rmhTNF单独治疗组(2.97%),并且联合治疗组给药24 h后会引发部分tk-细胞死亡(9.83%).结论:HSV-tk/GCV自杀基因系统与rmhTNF联合治疗具有显著的协同抗肿瘤效应,能够明显提高对肿瘤细胞的杀伤率;结合光学成像方法,能为更直观方便地检测各组药物分别对tk+细胞和tk-细胞的杀伤率,可为深入研究"旁观者效应"提供参考.
목적:응용광학성상방법검측HSV-tk/GCV자살기인계통여중조개조적인종류배사인자(recombinant human tumor necrosis factor,rmhTNF)적연합사용,대인연선선양낭성암세포(adenoid cystic carcinoma,ACC-M)적살상효솔.방법:실험분위사조,세포모형대조조、단순HSV-tk/GCV자살기인계통치료조、rmhTNF처리조、자살기인연합rmhTNF치료조.장은정표체흉감격매-록색형광단백(thymidine kinase-green fluorescen protenin,tk-GFP)적ACC-M세포(ACC-M-tk-GFP)안5 000개/공접충도96공판중,24 h후급약치료;분별우가약전、급약후6 h、급약후24 h진행형광성상.검측록색형광단백(green fluorescent protein,GFP)적형광용우준학현시흉감격매(tk)기인표체적종류세포,검측전화병정(propidium iodide,PI)적형광용우현시사망적종류세포.통과세포적투사도급기PI화GFP형광도상,분별계산tk+세포화tk-세포적사망솔.결과:HSV-tk/GCV자살기인계통여rmhTNF연합치료조적세포재가약후6 h취이경출현세포사망적상,이단순HSV-tk/GCV자살기인계통치료조적세포재가경석락위(ganciclovir,GCV)후24 h재출현세포사망,단순rmhTNF치료조재가약후24 h환몰유세포사망발생.대우급약후24 h적tk+세포사망솔,연합치료조(85.88%)명현고우GCV(38.13%)화rmhTNF단독치료조(2.97%),병차연합치료조급약24 h후회인발부분tk-세포사망(9.83%).결론:HSV-tk/GCV자살기인계통여rmhTNF연합치료구유현저적협동항종류효응,능구명현제고대종류세포적살상솔;결합광학성상방법,능위경직관방편지검측각조약물분별대tk+세포화tk-세포적살상솔,가위심입연구"방관자효응"제공삼고.