CAJ | 학술논문

根据GenBank中登录的鱼类神经坏死病毒CP基因序列,选择高度保守区域设计引物和TaqMan荧光探针,通过对实时荧光RT-PCR反应条件进行优化,建立了用于检测鱼类神经坏死病毒的实时荧光RT-PCR方法.利用该方法检测鱼类神经坏死病毒及其他多种常见的水生动物RNA病毒,结果只能检测到目的病毒,表明其具有良好的特异性.灵敏性试验发现,其最低检测限可达1.2 pg/gL,的总RNA.与RT-PCR的灵敏度对比试验表明,其敏感度比RT-PCR高100倍.对同一样品进行检测,在组内及组间的变异系数分别为0.9%以及1.5%,证实其重复性极好,并且从抽提核酸到得出结果仅需4h.对临床500份样品进行鱼类神经坏死病毒检测,结果发现有40份阳性样品.这些结果表明,本研究所建立的实时荧光RT-PCR能对鱼类神经坏死病毒进行准确、快速的检测,具有特异性好、灵敏度高的优点,是开展鱼类神经坏死病的临床检测和疫情监测工作的有力工具.[中国水产科学,2008,15(3):506-510]
근거GenBank중등록적어류신경배사병독CP기인서렬,선택고도보수구역설계인물화TaqMan형광탐침,통과대실시형광RT-PCR반응조건진행우화,건립료용우검측어류신경배사병독적실시형광RT-PCR방법.이용해방법검측어류신경배사병독급기타다충상견적수생동물RNA병독,결과지능검측도목적병독,표명기구유량호적특이성.령민성시험발현,기최저검측한가체1.2 pg/gL,적총RNA.여RT-PCR적령민도대비시험표명,기민감도비RT-PCR고100배.대동일양품진행검측,재조내급조간적변이계수분별위0.9%이급1.5%,증실기중복성겁호,병차종추제핵산도득출결과부수4h.대림상500빈양품진행어류신경배사병독검측,결과발현유40빈양성양품.저사결과표명,본연구소건립적실시형광RT-PCR능대어류신경배사병독진행준학、쾌속적검측,구유특이성호、령민도고적우점,시개전어류신경배사병적림상검측화역정감측공작적유력공구.[중국수산과학,2008,15(3):506-510]