西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2008年
9期
71-75,80
,共6页
孔娜%朱锦辉%陈耀锋%任慧莉%郭东伟
孔娜%硃錦輝%陳耀鋒%任慧莉%郭東偉
공나%주금휘%진요봉%임혜리%곽동위
烟草%HAL1基因%根癌农杆菌介导法%秦烟98
煙草%HAL1基因%根癌農桿菌介導法%秦煙98
연초%HAL1기인%근암농간균개도법%진연98
[目的]优化烟草的高效遗传转化体系.[方法]以陕西地区广泛种植的烟草品种秦烟98为试材,采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,LBA4404)介导法,将从酿酒酵母细胞中克隆到的具有较强耐盐表型的HAL1基因进行遗传转化,对农杆菌介导的遗传转化条件及其影响因素进行研究.[结果]用50 mg/L卡那霉素(Kan)筛选转化外植体用800 mg/L羧苄青霉素(Cb)除菌可以获得理想的筛选和除菌效果.以优化的农杆菌介导烟草叶片的遗传转化条件为:将未经过预培养(预培养0 d)的外植体用稀释150倍的农杆菌菌液(0D600=0.5)浸泡1min,转至MS1培养基上共培养48 h,用无菌水冲洗后于体积分数2%NaClO中浸泡15 min,用无菌水冲洗4～5次.置800 mg/L Cb+质量分数0.1%的甘露醇中浸泡约12 h除菌.[结论]获得了农杆菌介导烟草叶片遗传转化的最佳优化条件,有效地减少了外植体的污染率,提高了抗性芽分化率.
[目的]優化煙草的高效遺傳轉化體繫.[方法]以陝西地區廣汎種植的煙草品種秦煙98為試材,採用根癌農桿菌(Agrobacterium tumefaciens,LBA4404)介導法,將從釀酒酵母細胞中剋隆到的具有較彊耐鹽錶型的HAL1基因進行遺傳轉化,對農桿菌介導的遺傳轉化條件及其影響因素進行研究.[結果]用50 mg/L卡那黴素(Kan)篩選轉化外植體用800 mg/L羧芐青黴素(Cb)除菌可以穫得理想的篩選和除菌效果.以優化的農桿菌介導煙草葉片的遺傳轉化條件為:將未經過預培養(預培養0 d)的外植體用稀釋150倍的農桿菌菌液(0D600=0.5)浸泡1min,轉至MS1培養基上共培養48 h,用無菌水遲洗後于體積分數2%NaClO中浸泡15 min,用無菌水遲洗4～5次.置800 mg/L Cb+質量分數0.1%的甘露醇中浸泡約12 h除菌.[結論]穫得瞭農桿菌介導煙草葉片遺傳轉化的最佳優化條件,有效地減少瞭外植體的汙染率,提高瞭抗性芽分化率.
[목적]우화연초적고효유전전화체계.[방법]이협서지구엄범충식적연초품충진연98위시재,채용근암농간균(Agrobacterium tumefaciens,LBA4404)개도법,장종양주효모세포중극륭도적구유교강내염표형적HAL1기인진행유전전화,대농간균개도적유전전화조건급기영향인소진행연구.[결과]용50 mg/L잡나매소(Kan)사선전화외식체용800 mg/L최변청매소(Cb)제균가이획득이상적사선화제균효과.이우화적농간균개도연초협편적유전전화조건위:장미경과예배양(예배양0 d)적외식체용희석150배적농간균균액(0D600=0.5)침포1min,전지MS1배양기상공배양48 h,용무균수충세후우체적분수2%NaClO중침포15 min,용무균수충세4～5차.치800 mg/L Cb+질량분수0.1%적감로순중침포약12 h제균.[결론]획득료농간균개도연초협편유전전화적최가우화조건,유효지감소료외식체적오염솔,제고료항성아분화솔.
