中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2010年
11期
1439-1444
,共6页
李彩蓉%蔡飞%赵辛元%杨颖乔%余亚娟
李綵蓉%蔡飛%趙辛元%楊穎喬%餘亞娟
리채용%채비%조신원%양영교%여아연
肝细胞生长因子%糖原合成酶激酶-3β%信号传导及活化转录因子3%单核细胞趋化因子%细胞间黏附分子-1%糖尿病肾病
肝細胞生長因子%糖原閤成酶激酶-3β%信號傳導及活化轉錄因子3%單覈細胞趨化因子%細胞間黏附分子-1%糖尿病腎病
간세포생장인자%당원합성매격매-3β%신호전도급활화전록인자3%단핵세포추화인자%세포간점부분자-1%당뇨병신병
目的 观察肝细胞生长因子(HGF)对高糖环境下系膜细胞糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和信号传导及活化转录因子3(STAT3)表达的影响.方法 以大鼠系膜细胞为实验对象,给予HGF和高糖干预,实验中采用PI3K、p38MAPK、PKC、JAK2、ERK1/2抑制剂阻断其信号通路.系膜细胞转染野生型WT-GSK-3β,组成性激活型S9A-GSK-3β和显性负突变型KM-GSK-3β质粒,改变GSK-3β活性.Western印迹方法检测GSK-3β、pGSK-3β、STAT3、pSTAT3蛋白表达水平.酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养液中单核细胞趋化因子(MCP-1)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白含量.结果 HGF能明显改善高糖刺激引起的磷酸化GSK-3β(Ser9)蛋白降低及抑制p-STAT3蛋白表达.c-Met抑制剂能完全抑制HGF对磷酸化GSK-3β蛋白的调节作用,PI3K、PKC、JAK2抑制剂能部分抑制HGF对磷酸化GSK-3β蛋白的调节作用,而p38MAPK和ERK1/2抑制剂对HGF的作用无影响.高表达S9A-GSK-3β则剥夺了HGF对pSTAT3蛋白的抑制效应,及降低炎症因子MCP-1、ICAM-1的表达.结论 HGF可通过HGF受体及PI3K、PKC、JAK2信号通路介导高糖诱导系膜细胞GSK-3β和STAT3蛋白磷酸化,HGF拮抗高糖环境下炎症因子表达可能与GSK-3β蛋白失活有关.
目的 觀察肝細胞生長因子(HGF)對高糖環境下繫膜細胞糖原閤成酶激酶-3β(GSK-3β)和信號傳導及活化轉錄因子3(STAT3)錶達的影響.方法 以大鼠繫膜細胞為實驗對象,給予HGF和高糖榦預,實驗中採用PI3K、p38MAPK、PKC、JAK2、ERK1/2抑製劑阻斷其信號通路.繫膜細胞轉染野生型WT-GSK-3β,組成性激活型S9A-GSK-3β和顯性負突變型KM-GSK-3β質粒,改變GSK-3β活性.Western印跡方法檢測GSK-3β、pGSK-3β、STAT3、pSTAT3蛋白錶達水平.酶聯免疫吸附實驗(ELISA)檢測細胞培養液中單覈細胞趨化因子(MCP-1)和細胞間黏附分子-1(ICAM-1)蛋白含量.結果 HGF能明顯改善高糖刺激引起的燐痠化GSK-3β(Ser9)蛋白降低及抑製p-STAT3蛋白錶達.c-Met抑製劑能完全抑製HGF對燐痠化GSK-3β蛋白的調節作用,PI3K、PKC、JAK2抑製劑能部分抑製HGF對燐痠化GSK-3β蛋白的調節作用,而p38MAPK和ERK1/2抑製劑對HGF的作用無影響.高錶達S9A-GSK-3β則剝奪瞭HGF對pSTAT3蛋白的抑製效應,及降低炎癥因子MCP-1、ICAM-1的錶達.結論 HGF可通過HGF受體及PI3K、PKC、JAK2信號通路介導高糖誘導繫膜細胞GSK-3β和STAT3蛋白燐痠化,HGF拮抗高糖環境下炎癥因子錶達可能與GSK-3β蛋白失活有關.
목적 관찰간세포생장인자(HGF)대고당배경하계막세포당원합성매격매-3β(GSK-3β)화신호전도급활화전록인자3(STAT3)표체적영향.방법 이대서계막세포위실험대상,급여HGF화고당간예,실험중채용PI3K、p38MAPK、PKC、JAK2、ERK1/2억제제조단기신호통로.계막세포전염야생형WT-GSK-3β,조성성격활형S9A-GSK-3β화현성부돌변형KM-GSK-3β질립,개변GSK-3β활성.Western인적방법검측GSK-3β、pGSK-3β、STAT3、pSTAT3단백표체수평.매련면역흡부실험(ELISA)검측세포배양액중단핵세포추화인자(MCP-1)화세포간점부분자-1(ICAM-1)단백함량.결과 HGF능명현개선고당자격인기적린산화GSK-3β(Ser9)단백강저급억제p-STAT3단백표체.c-Met억제제능완전억제HGF대린산화GSK-3β단백적조절작용,PI3K、PKC、JAK2억제제능부분억제HGF대린산화GSK-3β단백적조절작용,이p38MAPK화ERK1/2억제제대HGF적작용무영향.고표체S9A-GSK-3β칙박탈료HGF대pSTAT3단백적억제효응,급강저염증인자MCP-1、ICAM-1적표체.결론 HGF가통과HGF수체급PI3K、PKC、JAK2신호통로개도고당유도계막세포GSK-3β화STAT3단백린산화,HGF길항고당배경하염증인자표체가능여GSK-3β단백실활유관.
