中国药物与临床
中國藥物與臨床
중국약물여림상
CHINESE REMEDIES & CLINICS
2011年
2期
140-143
,共4页
贾鹏%吕智%刘小丽%冯毅%薛小云
賈鵬%呂智%劉小麗%馮毅%薛小雲
가붕%려지%류소려%풍의%설소운
骨肉瘤%甲酸酯类%细胞增殖%细胞凋亡
骨肉瘤%甲痠酯類%細胞增殖%細胞凋亡
골육류%갑산지류%세포증식%세포조망
目的 以细胞有丝分裂阻滞剂Nocodazole为诱导物,诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡,并进行生物化学指标的检测.方法 首先,观察1 nmol/L～10 μmol/L递增浓度的Nocodazole对MG-63细胞的作用,然后选取10,50,100,500 nmol/L 4个浓度诱导凋亡,通过噻唑蓝(MTT)比色实验测定细胞生长曲线;流式细胞技术(FCM)分析细胞周期:免疫细胞化学方法检测PLKI表达情况;用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析Nocodazole作用前后MG-63细胞内PLK1基因表达情况.结果 不同浓度Nocodazole作用MG-63细胞24 h后,对细胞增殖的抑制作用呈浓度依赖性增加.流式细胞仪分析结果显示,Nocodazole作用MG-63细胞后,G0/G1期细胞含量降低,S期细胞比例增加,G2/M期细胞比例则明显增加,且随着处理浓度的增加其G2/M期细胞含量逐渐增加,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).Nocodazole作用后,免疫细胞化学检测显示,PLK1表达明显下降.RT-PCR分析显示经Nocodazole作用后的骨肉瘤细胞株MG-63表达PLK1较用药前明显下降.上述结果都有明显的量一效关系.结论 Nocodazole诱导MG-63细胞凋亡、G2/M期阻滞的机制可能是通过抑制PLK1基因的表达实现的.
目的 以細胞有絲分裂阻滯劑Nocodazole為誘導物,誘導骨肉瘤MG-63細胞凋亡,併進行生物化學指標的檢測.方法 首先,觀察1 nmol/L～10 μmol/L遞增濃度的Nocodazole對MG-63細胞的作用,然後選取10,50,100,500 nmol/L 4箇濃度誘導凋亡,通過噻唑藍(MTT)比色實驗測定細胞生長麯線;流式細胞技術(FCM)分析細胞週期:免疫細胞化學方法檢測PLKI錶達情況;用反轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)分析Nocodazole作用前後MG-63細胞內PLK1基因錶達情況.結果 不同濃度Nocodazole作用MG-63細胞24 h後,對細胞增殖的抑製作用呈濃度依賴性增加.流式細胞儀分析結果顯示,Nocodazole作用MG-63細胞後,G0/G1期細胞含量降低,S期細胞比例增加,G2/M期細胞比例則明顯增加,且隨著處理濃度的增加其G2/M期細胞含量逐漸增加,與對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05).Nocodazole作用後,免疫細胞化學檢測顯示,PLK1錶達明顯下降.RT-PCR分析顯示經Nocodazole作用後的骨肉瘤細胞株MG-63錶達PLK1較用藥前明顯下降.上述結果都有明顯的量一效關繫.結論 Nocodazole誘導MG-63細胞凋亡、G2/M期阻滯的機製可能是通過抑製PLK1基因的錶達實現的.
목적 이세포유사분렬조체제Nocodazole위유도물,유도골육류MG-63세포조망,병진행생물화학지표적검측.방법 수선,관찰1 nmol/L～10 μmol/L체증농도적Nocodazole대MG-63세포적작용,연후선취10,50,100,500 nmol/L 4개농도유도조망,통과새서람(MTT)비색실험측정세포생장곡선;류식세포기술(FCM)분석세포주기:면역세포화학방법검측PLKI표체정황;용반전록-취합매련반응(RT-PCR)분석Nocodazole작용전후MG-63세포내PLK1기인표체정황.결과 불동농도Nocodazole작용MG-63세포24 h후,대세포증식적억제작용정농도의뢰성증가.류식세포의분석결과현시,Nocodazole작용MG-63세포후,G0/G1기세포함량강저,S기세포비례증가,G2/M기세포비례칙명현증가,차수착처리농도적증가기G2/M기세포함량축점증가,여대조조비교차이유통계학의의(P＜0.05).Nocodazole작용후,면역세포화학검측현시,PLK1표체명현하강.RT-PCR분석현시경Nocodazole작용후적골육류세포주MG-63표체PLK1교용약전명현하강.상술결과도유명현적량일효관계.결론 Nocodazole유도MG-63세포조망、G2/M기조체적궤제가능시통과억제PLK1기인적표체실현적.
