CAJ | 학술논문

体细胞克隆的效率一直较低,这可能与成熟前卵母细胞的质量有关.猪卵母细胞主要来源于屠宰场的废弃卵巢,这暗示,卵母细胞可能处于发情周期的各个阶段.因此,体细胞核转移之前有必要筛选优质卵母细胞.本研究旨在探讨亮甲酚蓝染色筛选及曲古抑菌素A (TSA)对东北野猪(Sus scrofa ussuricus)核移植胚发育的影响.卵丘卵母细胞复合体经亮甲酚蓝(BCB)染色后分三组:BCB+组(胞质着色,葡萄糖-6-磷酸脱氧酶(G6PDH)活性低)、BCB-组(胞质未着色,G6PDH活性高)和对照组(不使用亮甲酚蓝染色).卵母细胞体外成熟培养后,对卵母细胞进行核移植操作,来源于BCB+卵母细胞的核移植胚使用50 nmol/L TSA处理,未使用TSA处理的来源于BCB+卵母细胞的核移植胚作为对照组.结果表明,BCB+卵母细胞的直径显著大于BCB-组(P＜0.05).来源于BCB+卵母细胞的核移植胚的初次卵裂时间要早于BCB-组及对照组.来源于BCB+卵母细胞的核移植胚的囊胚形成率显著高于BCB -组及对照组(P＜0.05).且50 nmol/L TSA处理可将来源于BCB+卵母细胞的核移植囊胚率提高到(29.6±2.8)％(P＜0.05).总之,来源于BCB+卵母细胞的核移植胚发育能力较强,且50 nmol/L的TSA可促进重构胚的体外发育.对卵母细胞进行BCB染色筛选并使用50 nmol/L的TSA处理重构胚,可提高东北野猪核移植重构胚的发育能力,为通过体细胞克隆法保护东北野猪资源创造条件.
체세포극륭적효솔일직교저,저가능여성숙전란모세포적질량유관.저란모세포주요래원우도재장적폐기란소,저암시,란모세포가능처우발정주기적각개계단.인차,체세포핵전이지전유필요사선우질란모세포.본연구지재탐토량갑분람염색사선급곡고억균소A (TSA)대동북야저(Sus scrofa ussuricus)핵이식배발육적영향.란구란모세포복합체경량갑분람(BCB)염색후분삼조:BCB+조(포질착색,포도당-6-린산탈양매(G6PDH)활성저)、BCB-조(포질미착색,G6PDH활성고)화대조조(불사용량갑분람염색).란모세포체외성숙배양후,대란모세포진행핵이식조작,래원우BCB+란모세포적핵이식배사용50 nmol/L TSA처리,미사용TSA처리적래원우BCB+란모세포적핵이식배작위대조조.결과표명,BCB+란모세포적직경현저대우BCB-조(P＜0.05).래원우BCB+란모세포적핵이식배적초차란렬시간요조우BCB-조급대조조.래원우BCB+란모세포적핵이식배적낭배형성솔현저고우BCB -조급대조조(P＜0.05).차50 nmol/L TSA처리가장래원우BCB+란모세포적핵이식낭배솔제고도(29.6±2.8)％(P＜0.05).총지,래원우BCB+란모세포적핵이식배발육능력교강,차50 nmol/L적TSA가촉진중구배적체외발육.대란모세포진행BCB염색사선병사용50 nmol/L적TSA처리중구배,가제고동북야저핵이식중구배적발육능력,위통과체세포극륭법보호동북야저자원창조조건.