CAJ | 학술논문

[目的] 在研究探究铅暴露对于神经胶原细胞的影响以及其诱发细胞内信号传导的通路.[方法与结果] 在生物体外培养条件下,低浓度的铅暴露(0.01 μmol/L)会诱发神经胶原细胞株U-373MG内的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)过量产生.而且,C57BL/6小鼠经腹腔注射含12.5 mg/kg体重之醋酸铅溶液后,也能诱导小鼠脑部之神经胶原细胞及神经细胞表达TNF-α.TNF-α可能会刺激astroglia的增生,或者使neuron cells死亡,并且这样的状况一般被认为与病理性的astrogliosis与demyelinisation有关.虽然铅使细胞表达TNF-α,但是不管是在体外培养的状态,分析U-373MG细胞增生速率以及用propidium iodine staining侦测细胞凋亡(apoptosis)的数目所得的结果;或是利用(terminal deoxynucleotidyl transferase labeling;TUNEL)染色法直接分析铅处理以后小鼠的脑部神经和胶原细胞凋亡的细胞数目,结果显示铅并不会直接抑制细胞生长或是引起凋亡.同样的以细菌内毒素(lipopolysaccharide;LPS)处理小鼠(10 mg/kg体重)或是细胞株U-373MG也不会直接抑制细胞生长或是引起凋亡.虽然细胞的存活所受的影响会因实验条件而有些差异性.除此之外,U373MG细胞在暴露0.01 μmol/L到10 μmol/L等不同浓度之醋酸铅后,以Western blot analysis侦测MAPK系列之蛋白的修饰改变,可以发现Raf,MEK,MAPK等信号传导蛋白的磷酸化会随着铅离子的浓度增加而上升.在MAPK激酶功能抑制剂PD98059的处理后,铅所诱发的TNF-α表达会受到抑制.虽然铅和细菌内毒素一样都能够引起神经胶原细胞株U-373MG表达TNF-α,但是,铅不管在任何浓度都不会导致I-kB的磷酸化,而细菌内毒素则会让I-kB的磷酸化.[结论] 铅和细菌内毒素在神经胶原细胞株U373MG内所引发的信号传导通路不同.探讨铅所诱发之信号传导通路以及了解铅调控TNF-α基因的机制,有助于理清铅的神经毒性和伤害细胞的毒理效应,并且建立有效而专一的解毒及治疗方式. [目的] 在研究探究鉛暴露對于神經膠原細胞的影響以及其誘髮細胞內信號傳導的通路.[方法與結果] 在生物體外培養條件下,低濃度的鉛暴露(0.01 μmol/L)會誘髮神經膠原細胞株U-373MG內的腫瘤壞死因子-α(TNF-α)過量產生.而且,C57BL/6小鼠經腹腔註射含12.5 mg/kg體重之醋痠鉛溶液後,也能誘導小鼠腦部之神經膠原細胞及神經細胞錶達TNF-α.TNF-α可能會刺激astroglia的增生,或者使neuron cells死亡,併且這樣的狀況一般被認為與病理性的astrogliosis與demyelinisation有關.雖然鉛使細胞錶達TNF-α,但是不管是在體外培養的狀態,分析U-373MG細胞增生速率以及用propidium iodine staining偵測細胞凋亡(apoptosis)的數目所得的結果;或是利用(terminal deoxynucleotidyl transferase labeling;TUNEL)染色法直接分析鉛處理以後小鼠的腦部神經和膠原細胞凋亡的細胞數目,結果顯示鉛併不會直接抑製細胞生長或是引起凋亡.同樣的以細菌內毒素(lipopolysaccharide;LPS)處理小鼠(10 mg/kg體重)或是細胞株U-373MG也不會直接抑製細胞生長或是引起凋亡.雖然細胞的存活所受的影響會因實驗條件而有些差異性.除此之外,U373MG細胞在暴露0.01 μmol/L到10 μmol/L等不同濃度之醋痠鉛後,以Western blot analysis偵測MAPK繫列之蛋白的脩飾改變,可以髮現Raf,MEK,MAPK等信號傳導蛋白的燐痠化會隨著鉛離子的濃度增加而上升.在MAPK激酶功能抑製劑PD98059的處理後,鉛所誘髮的TNF-α錶達會受到抑製.雖然鉛和細菌內毒素一樣都能夠引起神經膠原細胞株U-373MG錶達TNF-α,但是,鉛不管在任何濃度都不會導緻I-kB的燐痠化,而細菌內毒素則會讓I-kB的燐痠化.[結論] 鉛和細菌內毒素在神經膠原細胞株U373MG內所引髮的信號傳導通路不同.探討鉛所誘髮之信號傳導通路以及瞭解鉛調控TNF-α基因的機製,有助于理清鉛的神經毒性和傷害細胞的毒理效應,併且建立有效而專一的解毒及治療方式.
[목적] 재연구탐구연폭로대우신경효원세포적영향이급기유발세포내신호전도적통로.[방법여결과] 재생물체외배양조건하,저농도적연폭로(0.01 μmol/L)회유발신경효원세포주U-373MG내적종류배사인자-α(TNF-α)과양산생.이차,C57BL/6소서경복강주사함12.5 mg/kg체중지작산연용액후,야능유도소서뇌부지신경효원세포급신경세포표체TNF-α.TNF-α가능회자격astroglia적증생,혹자사neuron cells사망,병차저양적상황일반피인위여병이성적astrogliosis여demyelinisation유관.수연연사세포표체TNF-α,단시불관시재체외배양적상태,분석U-373MG세포증생속솔이급용propidium iodine staining정측세포조망(apoptosis)적수목소득적결과;혹시이용(terminal deoxynucleotidyl transferase labeling;TUNEL)염색법직접분석연처리이후소서적뇌부신경화효원세포조망적세포수목,결과현시연병불회직접억제세포생장혹시인기조망.동양적이세균내독소(lipopolysaccharide;LPS)처리소서(10 mg/kg체중)혹시세포주U-373MG야불회직접억제세포생장혹시인기조망.수연세포적존활소수적영향회인실험조건이유사차이성.제차지외,U373MG세포재폭로0.01 μmol/L도10 μmol/L등불동농도지작산연후,이Western blot analysis정측MAPK계렬지단백적수식개변,가이발현Raf,MEK,MAPK등신호전도단백적린산화회수착연리자적농도증가이상승.재MAPK격매공능억제제PD98059적처리후,연소유발적TNF-α표체회수도억제.수연연화세균내독소일양도능구인기신경효원세포주U-373MG표체TNF-α,단시,연불관재임하농도도불회도치I-kB적린산화,이세균내독소칙회양I-kB적린산화.[결론] 연화세균내독소재신경효원세포주U373MG내소인발적신호전도통로불동.탐토연소유발지신호전도통로이급료해연조공TNF-α기인적궤제,유조우리청연적신경독성화상해세포적독리효응,병차건립유효이전일적해독급치료방식.