CAJ | 학술논문

背景与目的:大量研究表明端粒酶活性与肿瘤细胞的发生、发展密切相关,而且乙型肝炎病毒 (hepatitis B virus,HBV)复制、端粒酶活性高低与细胞周期亦存在相关性.为进一步证实其内在联系,本实验探讨无血清培养、全反式维甲酸( all- trans- retinoic acid,RA)对 HBV DNA转染的人肝癌细胞株 HepG2细胞周期的影响以及细胞周期与端粒酶活性、 HBV复制状态的关系.方法:分别用 RA、无血清培养处理 HepG2细胞并与对照组比较.细胞周期用流式细胞仪测定,端粒酶活性用 TRAP- PCR- ELISA定量检测, HBV DNA分别用荧光 PCR定量检测及斑点杂交半定量检测, HBsAg和 HBeAg用 ELISA方法定量检测.结果: RA、无血清培养使 HepG2细胞生长受抑制,停滞在 G0/G1期( RA组、无血清培养组 G0/G1期时相百分比分别为 68.3%、 65.2%),端粒酶活性明显下降( RA组、无血清培养组代表端粒酶活性的吸光度 A值分别为 0.32、 0.41),与对照组( G0/G1期时相百分比为 43.1%,代表端粒酶活性吸光度 A值为 1.34)相比,两者之间有显著性差异 (P< 0.01);细胞培养液中 HBV DNA、 HBsAg和 HBeAg含量显著增加( RA组分别为 4.4× 106 copies/ml、 3.5、 19.8;无血清培养组分别为 5.1× 106 copies/ml、 3.7、 22.5),与对照组(分别为 1.2× 106 copies/ml、 1.3、 13.4)相比,两者之间有显著性差异 (P< 0.01).结论:端粒酶活性与 HepG2的细胞周期有关,主要在 S期表达; HBV复制与细胞周期有明显关系,静息细胞 HBV复制程度较高,再生增殖活跃细胞 HBV复制程度较低.
배경여목적:대량연구표명단립매활성여종류세포적발생、발전밀절상관,이차을형간염병독 (hepatitis B virus,HBV)복제、단립매활성고저여세포주기역 존재상관성.위진일보증실기내재련계,본실험탐토무혈청배양、전반식유갑산( all- trans- retinoic acid,RA)대 HBV DNA전염적인간암세포주 HepG2세포주기적영향이급세포주기여단립매활성、 HBV복제상태적관계.방법:분별용 RA、무혈청배양처리 HepG2세포병여대조조비교.세포주기용류식세포의측정,단립매활성용 TRAP- PCR- ELISA정량검측, HBV DNA분별용형광 PCR정량검측급반점잡교반정량검측, HBsAg화 HBeAg용 ELISA방법정량검측.결과: RA、무혈청배양사 HepG2세포생장수억제,정체재 G0/G1기( RA조、무혈청배양조 G0/G1기시상백분비분별위 68.3%、 65.2%),단립매활성명현하강( RA조、무혈청배양조대표단립매활성적흡광도 A치분별위 0.32、 0.41),여대조조( G0/G1기시상백분비위 43.1%,대표단립매활성흡광도 A치위 1.34)상비,량자지간유현저성차이 (P< 0.01);세포배양액중 HBV DNA、 HBsAg화 HBeAg함량현저증가( RA조분별위 4.4× 106 copies/ml、 3.5、 19.8;무혈청배양조분별위 5.1× 106 copies/ml、 3.7、 22.5),여대조조(분별위 1.2× 106 copies/ml、 1.3、 13.4)상비,량자지간유현저성차이 (P< 0.01).결론:단립매활성여 HepG2적세포주기유관,주요재 S기표체; HBV복제여세포주기유명현관계,정식세포 HBV복제정도교고,재생증식활약세포 HBV복제정도교저.