热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2007年
8期
718-721
,共4页
彭礼飞%胡晶晶%邓莉%杨陈%甘伟琼%吴亚敏%付汉维
彭禮飛%鬍晶晶%鄧莉%楊陳%甘偉瓊%吳亞敏%付漢維
팽례비%호정정%산리%양진%감위경%오아민%부한유
十二指肠钩虫%脂肪酸和视黄醇结合蛋白(Ad-FAR-1)%克隆%原核表达
十二指腸鉤蟲%脂肪痠和視黃醇結閤蛋白(Ad-FAR-1)%剋隆%原覈錶達
십이지장구충%지방산화시황순결합단백(Ad-FAR-1)%극륭%원핵표체
目的 克隆十二指肠钩虫脂肪酸与视黄醇结合蛋白(Ad-FAR-1)基因并在大肠杆菌中表达.方法 运用3'RACE及RT-PCR技术分别扩增Ad-FAR-1 cDNA部分片段,获得序列经拼接后利用在线BLAST程序检索GenBank中相似的核酸序列及推导的氨基酸序列;设计引物,将Ad-FAR-1成熟肽编码序列克隆、连接到原核表达载体pET32a,构建重组表达质粒并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达情况.结果 成功克隆到Ad-FAR-1全长cDNA序列并构建了pET32a/Ad-FAR-1原核表达重组质粒,Ad-FAR-1融合蛋白在大肠中得到了高效表达.结论 成功获得并表达了十二指肠钩虫脂肪酸与视黄醇结合蛋白(Ad-FAR-1)基因,为进一步研究该蛋白的特性与功能奠定了基础.
目的 剋隆十二指腸鉤蟲脂肪痠與視黃醇結閤蛋白(Ad-FAR-1)基因併在大腸桿菌中錶達.方法 運用3'RACE及RT-PCR技術分彆擴增Ad-FAR-1 cDNA部分片段,穫得序列經拼接後利用在線BLAST程序檢索GenBank中相似的覈痠序列及推導的氨基痠序列;設計引物,將Ad-FAR-1成熟肽編碼序列剋隆、連接到原覈錶達載體pET32a,構建重組錶達質粒併轉化到大腸桿菌BL21(DE3)中用IPTG誘導錶達,SDS-PAGE分析錶達情況.結果 成功剋隆到Ad-FAR-1全長cDNA序列併構建瞭pET32a/Ad-FAR-1原覈錶達重組質粒,Ad-FAR-1融閤蛋白在大腸中得到瞭高效錶達.結論 成功穫得併錶達瞭十二指腸鉤蟲脂肪痠與視黃醇結閤蛋白(Ad-FAR-1)基因,為進一步研究該蛋白的特性與功能奠定瞭基礎.
목적 극륭십이지장구충지방산여시황순결합단백(Ad-FAR-1)기인병재대장간균중표체.방법 운용3'RACE급RT-PCR기술분별확증Ad-FAR-1 cDNA부분편단,획득서렬경병접후이용재선BLAST정서검색GenBank중상사적핵산서렬급추도적안기산서렬;설계인물,장Ad-FAR-1성숙태편마서렬극륭、련접도원핵표체재체pET32a,구건중조표체질립병전화도대장간균BL21(DE3)중용IPTG유도표체,SDS-PAGE분석표체정황.결과 성공극륭도Ad-FAR-1전장cDNA서렬병구건료pET32a/Ad-FAR-1원핵표체중조질립,Ad-FAR-1융합단백재대장중득도료고효표체.결론 성공획득병표체료십이지장구충지방산여시황순결합단백(Ad-FAR-1)기인,위진일보연구해단백적특성여공능전정료기출.
