中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
5期
870-877
,共8页
余新%刘天德%袁荣发%王庆诺%李国惠%邵江华
餘新%劉天德%袁榮髮%王慶諾%李國惠%邵江華
여신%류천덕%원영발%왕경낙%리국혜%소강화
FAT10蛋白质%真核翻译延伸因子1α1%RNA干扰
FAT10蛋白質%真覈翻譯延伸因子1α1%RNA榦擾
FAT10단백질%진핵번역연신인자1α1%RNA간우
目的:利用酵母双杂交技术筛选类泛素蛋白FAT10(HLA-F adjacent transcript 10)在肝癌细胞Hep3B中相互作用的蛋白,为探讨FAT10蛋白在肝癌发生中的作用机制提供依据.方法:利用Clontech GAL4 酵母双杂交系统筛选人肝癌细胞系Hep3B的cDNA文库,以获得与FAT10相互作用的蛋白分子;通过回交实验、免疫共沉淀和激光共聚焦细胞内共定位实验验证两者之间的相互作用;通过RNA干扰降低FAT10表达观察真核翻译延伸因子1α1(eEF1A1)的表达情况.结果:酵母双杂交筛选得到相互作用蛋白eEF1A1,激光共聚焦细胞内共定位确定FAT10和eEF1A1均位于细胞质内,存在共定位;回交实验和免疫共沉淀实验再次确认eEF1A1能够与FAT10相互作用;FAT10表达降低伴随着eEF1A1的表达下调.结论:FAT10能够与eEF1A1相互作用;FAT10可能通过eEF1A1来实现其部分功能.
目的:利用酵母雙雜交技術篩選類汎素蛋白FAT10(HLA-F adjacent transcript 10)在肝癌細胞Hep3B中相互作用的蛋白,為探討FAT10蛋白在肝癌髮生中的作用機製提供依據.方法:利用Clontech GAL4 酵母雙雜交繫統篩選人肝癌細胞繫Hep3B的cDNA文庫,以穫得與FAT10相互作用的蛋白分子;通過迴交實驗、免疫共沉澱和激光共聚焦細胞內共定位實驗驗證兩者之間的相互作用;通過RNA榦擾降低FAT10錶達觀察真覈翻譯延伸因子1α1(eEF1A1)的錶達情況.結果:酵母雙雜交篩選得到相互作用蛋白eEF1A1,激光共聚焦細胞內共定位確定FAT10和eEF1A1均位于細胞質內,存在共定位;迴交實驗和免疫共沉澱實驗再次確認eEF1A1能夠與FAT10相互作用;FAT10錶達降低伴隨著eEF1A1的錶達下調.結論:FAT10能夠與eEF1A1相互作用;FAT10可能通過eEF1A1來實現其部分功能.
목적:이용효모쌍잡교기술사선류범소단백FAT10(HLA-F adjacent transcript 10)재간암세포Hep3B중상호작용적단백,위탐토FAT10단백재간암발생중적작용궤제제공의거.방법:이용Clontech GAL4 효모쌍잡교계통사선인간암세포계Hep3B적cDNA문고,이획득여FAT10상호작용적단백분자;통과회교실험、면역공침정화격광공취초세포내공정위실험험증량자지간적상호작용;통과RNA간우강저FAT10표체관찰진핵번역연신인자1α1(eEF1A1)적표체정황.결과:효모쌍잡교사선득도상호작용단백eEF1A1,격광공취초세포내공정위학정FAT10화eEF1A1균위우세포질내,존재공정위;회교실험화면역공침정실험재차학인eEF1A1능구여FAT10상호작용;FAT10표체강저반수착eEF1A1적표체하조.결론:FAT10능구여eEF1A1상호작용;FAT10가능통과eEF1A1래실현기부분공능.
