中华肝脏病杂志
中華肝髒病雜誌
중화간장병잡지
CHINESE JOURNAL OF HEPATOLOGY
2004年
3期
148-150
,共3页
张静%刘彦仿%杨守京%乔庆%程虹%马福成%陈万录
張靜%劉彥倣%楊守京%喬慶%程虹%馬福成%陳萬錄
장정%류언방%양수경%교경%정홍%마복성%진만록
癌,肝细胞%单链抗体%免疫毒素%肿瘤坏死因子
癌,肝細胞%單鏈抗體%免疫毒素%腫瘤壞死因子
암,간세포%단련항체%면역독소%종류배사인자
目的制备高效、低毒的抗肝癌单链免疫毒素.方法将人突变型肿瘤坏死因子α(mTNF α)与人源化抗肝癌单链抗体hscFv25基因连接,构建pGEX4T-1/hscFv25-mTNFα融合蛋白原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化目的蛋白,经western blot鉴定之后,进行荷肝癌(SMMC-7721)裸鼠体内初步抑瘤实验,并对治疗后裸鼠肿瘤组织进行抗TNF α的免疫组织化学染色.结果原核表达载体pGEX4T 1/hscFv25-mTNFα融合蛋白的表达量占细菌总蛋白的12%,hscFv25-mTNFα治疗组对荷肝癌裸鼠的有效率为5/5,其中2/5为完全缓解,3/5为部分缓解,疗效明显高于mTNF α对照组(F=8.70,P＜0.05),治疗组裸鼠的肝、肺等组织中未见转移性病灶,经hscFv25-mTNF α治疗后的肿瘤组织,呈TNF α弥漫阳性反应,阳性颗粒主要位于瘤细胞的胞质中.结论 hscFv25-mTNF α是高效、低毒的抗肝癌单链免疫毒素.
目的製備高效、低毒的抗肝癌單鏈免疫毒素.方法將人突變型腫瘤壞死因子α(mTNF α)與人源化抗肝癌單鏈抗體hscFv25基因連接,構建pGEX4T-1/hscFv25-mTNFα融閤蛋白原覈錶達載體,在大腸桿菌中錶達併純化目的蛋白,經western blot鑒定之後,進行荷肝癌(SMMC-7721)裸鼠體內初步抑瘤實驗,併對治療後裸鼠腫瘤組織進行抗TNF α的免疫組織化學染色.結果原覈錶達載體pGEX4T 1/hscFv25-mTNFα融閤蛋白的錶達量佔細菌總蛋白的12%,hscFv25-mTNFα治療組對荷肝癌裸鼠的有效率為5/5,其中2/5為完全緩解,3/5為部分緩解,療效明顯高于mTNF α對照組(F=8.70,P＜0.05),治療組裸鼠的肝、肺等組織中未見轉移性病竈,經hscFv25-mTNF α治療後的腫瘤組織,呈TNF α瀰漫暘性反應,暘性顆粒主要位于瘤細胞的胞質中.結論 hscFv25-mTNF α是高效、低毒的抗肝癌單鏈免疫毒素.
목적제비고효、저독적항간암단련면역독소.방법장인돌변형종류배사인자α(mTNF α)여인원화항간암단련항체hscFv25기인련접,구건pGEX4T-1/hscFv25-mTNFα융합단백원핵표체재체,재대장간균중표체병순화목적단백,경western blot감정지후,진행하간암(SMMC-7721)라서체내초보억류실험,병대치료후라서종류조직진행항TNF α적면역조직화학염색.결과원핵표체재체pGEX4T 1/hscFv25-mTNFα융합단백적표체량점세균총단백적12%,hscFv25-mTNFα치료조대하간암라서적유효솔위5/5,기중2/5위완전완해,3/5위부분완해,료효명현고우mTNF α대조조(F=8.70,P＜0.05),치료조라서적간、폐등조직중미견전이성병조,경hscFv25-mTNF α치료후적종류조직,정TNF α미만양성반응,양성과립주요위우류세포적포질중.결론 hscFv25-mTNF α시고효、저독적항간암단련면역독소.
