CAJ | 학술논문

目的在小型猪急性冠状动脉(冠脉)闭塞模型上,探讨重组腺相关病毒载体携带人血管内皮生长因子165基因(rAAV2-VEGF165)治疗冠脉闭塞性疾病的有效性及其量效关系,为进一步应用rAAV2-VEGFi65治疗慢性心肌缺血的研究探索较合适的剂量.方法以微开胸心肌内注射的方法将rAAV2-VEGF165导入小型猪心肌,实验组分成4个剂量组(n=3):1×1011v.g(virus genome),5×1011v.g,1×1012v.g,5×1012v.g.对照组(n=3)注射磷酸盐缓冲液(PBS).采用RT-PCR以及免疫组化方法观察各组VEGF165mRNA和蛋白的表达,通过心肌血管计数及冠脉造影,观察各剂量组促进血管生成的生物学效应.结果术后4周,各实验组心肌组织均可检测到VEGF165mRNA的表达,且各组VEGF165蛋白表达水平均高于对照组;1×1012v.g组及5×1012v.g组心肌毛细血管密度大于对照组,5×1011v.g组及其以上剂量组冠脉侧支循环分级的增加优于对照组.结论心肌内注射rAAV2-VEGF165能在缺血心肌中有效表达VEGF mRNA及其蛋白,在一定剂量范围,rAAV2-VEGF165能够增加缺血心肌毛细血管密度,促进闭塞冠脉的侧支血管生成.结果显示,在小型猪心肌缺血模型上,rAAV2-VEGF1651×1012v.g是较理想的剂量.
목적재소형저급성관상동맥(관맥)폐새모형상,탐토중조선상관병독재체휴대인혈관내피생장인자165기인(rAAV2-VEGF165)치료관맥폐새성질병적유효성급기량효관계,위진일보응용rAAV2-VEGFi65치료만성심기결혈적연구탐색교합괄적제량.방법이미개흉심기내주사적방법장rAAV2-VEGF165도입소형저심기,실험조분성4개제량조(n=3):1×1011v.g(virus genome),5×1011v.g,1×1012v.g,5×1012v.g.대조조(n=3)주사린산염완충액(PBS).채용RT-PCR이급면역조화방법관찰각조VEGF165mRNA화단백적표체,통과심기혈관계수급관맥조영,관찰각제량조촉진혈관생성적생물학효응.결과술후4주,각실험조심기조직균가검측도VEGF165mRNA적표체,차각조VEGF165단백표체수평균고우대조조;1×1012v.g조급5×1012v.g조심기모세혈관밀도대우대조조,5×1011v.g조급기이상제량조관맥측지순배분급적증가우우대조조.결론심기내주사rAAV2-VEGF165능재결혈심기중유효표체VEGF mRNA급기단백,재일정제량범위,rAAV2-VEGF165능구증가결혈심기모세혈관밀도,촉진폐새관맥적측지혈관생성.결과현시,재소형저심기결혈모형상,rAAV2-VEGF1651×1012v.g시교이상적제량.