CAJ | 학술논문

溶菌酶是机体先天免疫系统中一个重要的效应分子, 参与机体多种免疫反应, 在溶菌过程中形成一个水解体系, 破坏和消除侵入体内的病原, 从而实现机体的免疫防御.从中国明对虾中克隆得到了溶菌酶基因(称为FcLyz基因), 该基因全长709 bp, 其完整的阅读框为477 bp, 编码158个氨基酸, 前18个氨基酸(-1～-18)为信号肽, 成熟肽由140个氨基酸组成(1-140aa), 其分子量为16.2 kD.经SMART分析,该基因具有1个溶菌酶1(LYZ1)结构域(19-130aa).半定量RT-PCR分析结果表明溶菌酶虽在多种组织中有较低水平的组成性表达, 但在细菌诱导的血细胞、心脏、肝胰腺和鳃等多种组织中表达上调.将中国明对虾溶菌酶基因的成熟肽亚克隆进原核表达载体pET-30a (+)中, 转化大肠杆菌BL21(DE3), 再进行诱导表达和亲和纯化, 得到了纯化的重组溶菌酶, 并进行了抑菌活性检测.结果表明, 重组对虾溶菌酶对革兰氏阳性菌的抑菌能力较强, 最小抑菌浓度达到3.43 -mol/L, 但对革兰氏阴性菌抑制作用较小.上述结果表明, 该溶菌酶作为一种重要的免疫效应分子, 参与了对虾的免疫防御反应.
용균매시궤체선천면역계통중일개중요적효응분자, 삼여궤체다충면역반응, 재용균과정중형성일개수해체계, 파배화소제침입체내적병원, 종이실현궤체적면역방어.종중국명대하중극륭득도료용균매기인(칭위FcLyz기인), 해기인전장709 bp, 기완정적열독광위477 bp, 편마158개안기산, 전18개안기산(-1～-18)위신호태, 성숙태유140개안기산조성(1-140aa), 기분자량위16.2 kD.경SMART분석,해기인구유1개용균매1(LYZ1)결구역(19-130aa).반정량RT-PCR분석결과표명용균매수재다충조직중유교저수평적조성성표체, 단재세균유도적혈세포、심장、간이선화새등다충조직중표체상조.장중국명대하용균매기인적성숙태아극륭진원핵표체재체pET-30a (+)중, 전화대장간균BL21(DE3), 재진행유도표체화친화순화, 득도료순화적중조용균매, 병진행료억균활성검측.결과표명, 중조대하용균매대혁란씨양성균적억균능력교강, 최소억균농도체도3.43 -mol/L, 단대혁란씨음성균억제작용교소.상술결과표명, 해용균매작위일충중요적면역효응분자, 삼여료대하적면역방어반응.