广西植物
廣西植物
엄서식물
GUIHAIA
2009年
5期
664-668,710
,共6页
徐春香%何勇强%尉义明%卢博彬%胡桂兵%陈厚彬
徐春香%何勇彊%尉義明%盧博彬%鬍桂兵%陳厚彬
서춘향%하용강%위의명%로박빈%호계병%진후빈
香蕉%胚性细胞悬浮系%根癌农杆菌介导法%遗传转化
香蕉%胚性細胞懸浮繫%根癌農桿菌介導法%遺傳轉化
향초%배성세포현부계%근암농간균개도법%유전전화
通过PCR从'京都七寸人参'胡萝卜基因组DNA中扩增抗冻蛋白基因,测序结果表明该基因的核苷酸序列与从宁夏'吴忠'胡萝卜中克隆的完全一致.先后将获得的胡萝卜afp基因克隆和亚克隆至pMD18-T和pBI121,构建植物表达载体pBI121-afp.通过冻融法将pBI121-afp导入根癌农杆菌EHA105中.以香蕉栽培品种'北大矮蕉'的胚性细胞悬浮系为受体,采用农杆菌介导法将胡萝卜afp基因导入其中,然后在Kanamycin的选择压力下通过体细胞胚发生途径进行植株再生.共获得抗性再生植株9株,其中两株经PCR检测呈阳性,可初步确定目的基因已经整合到这两株转基因香蕉植株的基因组中.
通過PCR從'京都七吋人參'鬍蘿蔔基因組DNA中擴增抗凍蛋白基因,測序結果錶明該基因的覈苷痠序列與從寧夏'吳忠'鬍蘿蔔中剋隆的完全一緻.先後將穫得的鬍蘿蔔afp基因剋隆和亞剋隆至pMD18-T和pBI121,構建植物錶達載體pBI121-afp.通過凍融法將pBI121-afp導入根癌農桿菌EHA105中.以香蕉栽培品種'北大矮蕉'的胚性細胞懸浮繫為受體,採用農桿菌介導法將鬍蘿蔔afp基因導入其中,然後在Kanamycin的選擇壓力下通過體細胞胚髮生途徑進行植株再生.共穫得抗性再生植株9株,其中兩株經PCR檢測呈暘性,可初步確定目的基因已經整閤到這兩株轉基因香蕉植株的基因組中.
통과PCR종'경도칠촌인삼'호라복기인조DNA중확증항동단백기인,측서결과표명해기인적핵감산서렬여종저하'오충'호라복중극륭적완전일치.선후장획득적호라복afp기인극륭화아극륭지pMD18-T화pBI121,구건식물표체재체pBI121-afp.통과동융법장pBI121-afp도입근암농간균EHA105중.이향초재배품충'북대왜초'적배성세포현부계위수체,채용농간균개도법장호라복afp기인도입기중,연후재Kanamycin적선택압력하통과체세포배발생도경진행식주재생.공획득항성재생식주9주,기중량주경PCR검측정양성,가초보학정목적기인이경정합도저량주전기인향초식주적기인조중.
