蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2011年
4期
606-613
,共8页
张瑶瑶%曹广力%薛仁宇%贡成良
張瑤瑤%曹廣力%薛仁宇%貢成良
장요요%조엄력%설인우%공성량
家蚕%vis基因%蛋白结构%多克隆抗体%组织表达谱%亚细胞定位
傢蠶%vis基因%蛋白結構%多剋隆抗體%組織錶達譜%亞細胞定位
가잠%vis기인%단백결구%다극륭항체%조직표체보%아세포정위
同源异型结构域蛋白( homeobox,HOX)基因是对生物体的生长发育从时间和空间上进行调控的一类基因.Vis( vismay)属于同源异型结构域蛋白转化生长影响因子(transforming growth interacting factor,TGIF)家族成员,在脊椎动物的研究中表明TGIF是转化生长因子-β(transforming growth factor β,TGF-β)信号转导途径中的转录抑制子,但在果蝇(Drosophila melanogaster)的研究中发现其是一种转录激活子.基于为探究家蚕(Bombyx mori)中vis基因的功能提供基础信息的目的,在电子克隆的基础上通过RT-PCR从家蚕5龄幼虫精巢cDNA中克隆了长度为847 bp的vis基因(Bmvis)片段(GenBank登录号:JF412700).蛋白结构分析表明Bmvis在HOX结构域的螺旋区和TALE区段内高度保守,同时在HOX结构域外的C末端大约20个氨基酸也是高度保守的.进化分析显示昆虫的Vis与Achi (achintya)聚为一类,但Vis与Achi根据物种分类关系聚在一起.对Bmvis在家蚕5龄第3天幼虫组织中表达的RT-PCR检测显示其仅在精巢中表达.将Bmvis进行原核表达后获得抗Bmvis多克隆抗体,亚细胞定位显示Bmvis在细胞核和细胞质中均有表达,但主要分布在细胞核中.
同源異型結構域蛋白( homeobox,HOX)基因是對生物體的生長髮育從時間和空間上進行調控的一類基因.Vis( vismay)屬于同源異型結構域蛋白轉化生長影響因子(transforming growth interacting factor,TGIF)傢族成員,在脊椎動物的研究中錶明TGIF是轉化生長因子-β(transforming growth factor β,TGF-β)信號轉導途徑中的轉錄抑製子,但在果蠅(Drosophila melanogaster)的研究中髮現其是一種轉錄激活子.基于為探究傢蠶(Bombyx mori)中vis基因的功能提供基礎信息的目的,在電子剋隆的基礎上通過RT-PCR從傢蠶5齡幼蟲精巢cDNA中剋隆瞭長度為847 bp的vis基因(Bmvis)片段(GenBank登錄號:JF412700).蛋白結構分析錶明Bmvis在HOX結構域的螺鏇區和TALE區段內高度保守,同時在HOX結構域外的C末耑大約20箇氨基痠也是高度保守的.進化分析顯示昆蟲的Vis與Achi (achintya)聚為一類,但Vis與Achi根據物種分類關繫聚在一起.對Bmvis在傢蠶5齡第3天幼蟲組織中錶達的RT-PCR檢測顯示其僅在精巢中錶達.將Bmvis進行原覈錶達後穫得抗Bmvis多剋隆抗體,亞細胞定位顯示Bmvis在細胞覈和細胞質中均有錶達,但主要分佈在細胞覈中.
동원이형결구역단백( homeobox,HOX)기인시대생물체적생장발육종시간화공간상진행조공적일류기인.Vis( vismay)속우동원이형결구역단백전화생장영향인자(transforming growth interacting factor,TGIF)가족성원,재척추동물적연구중표명TGIF시전화생장인자-β(transforming growth factor β,TGF-β)신호전도도경중적전록억제자,단재과승(Drosophila melanogaster)적연구중발현기시일충전록격활자.기우위탐구가잠(Bombyx mori)중vis기인적공능제공기출신식적목적,재전자극륭적기출상통과RT-PCR종가잠5령유충정소cDNA중극륭료장도위847 bp적vis기인(Bmvis)편단(GenBank등록호:JF412700).단백결구분석표명Bmvis재HOX결구역적라선구화TALE구단내고도보수,동시재HOX결구역외적C말단대약20개안기산야시고도보수적.진화분석현시곤충적Vis여Achi (achintya)취위일류,단Vis여Achi근거물충분류관계취재일기.대Bmvis재가잠5령제3천유충조직중표체적RT-PCR검측현시기부재정소중표체.장Bmvis진행원핵표체후획득항Bmvis다극륭항체,아세포정위현시Bmvis재세포핵화세포질중균유표체,단주요분포재세포핵중.
