临床神经外科杂志
臨床神經外科雜誌
림상신경외과잡지
JOURNAL OF CLINICAL NEUROSURGERY
2012年
2期
78-81
,共4页
张曙光%钱春发%潘天鸿%万意%王之敏%石磊
張曙光%錢春髮%潘天鴻%萬意%王之敏%石磊
장서광%전춘발%반천홍%만의%왕지민%석뢰
微RNA%甲基化%锁核酸%肽核酸
微RNA%甲基化%鎖覈痠%肽覈痠
미RNA%갑기화%쇄핵산%태핵산
目的 探讨目前常见的甲基化、锁核酸和肽核酸三种方式修饰的反义寡聚核苷酸对miR-125b的抑制作用,寻求一种高效的、特异性的miRNA表达沉默方式.方法 分别合成甲基化、锁核酸和肽核酸三种方式修饰的反义寡聚核苷酸转染U87细胞,流式细胞仪分析转染效率,MTT评价细胞毒性,实时荧光定量PCR分析miR-125b表达水平.结果 48 h甲基化、锁核酸、肽核酸修饰的反义寡聚核苷酸使用Fugene HD转染效率无明显差异.无转染试剂共培养甲基化、锁核酸和肽核酸修饰的反义寡聚核苷酸,肽核酸修饰的转染效率均显著高于甲基化、锁核酸修饰的反义寡聚核苷酸.使用Fugene HD转染的甲基化、锁核酸和肽核酸修饰的反义寡聚核苷酸三者之间无明显毒性差异.锁核酸和肽核酸修饰的反义寡聚核苷酸对miR-125b的抑制作用显著高于甲基化；肽核酸修饰的反义寡聚核苷酸抑制能力及持续性显著高于甲基化和锁核酸修饰.结论 肽核酸修饰的反义寡聚核苷酸在抑制miRNA表达能力上具有显著的高效性、安全性和持续性.
目的 探討目前常見的甲基化、鎖覈痠和肽覈痠三種方式脩飾的反義寡聚覈苷痠對miR-125b的抑製作用,尋求一種高效的、特異性的miRNA錶達沉默方式.方法 分彆閤成甲基化、鎖覈痠和肽覈痠三種方式脩飾的反義寡聚覈苷痠轉染U87細胞,流式細胞儀分析轉染效率,MTT評價細胞毒性,實時熒光定量PCR分析miR-125b錶達水平.結果 48 h甲基化、鎖覈痠、肽覈痠脩飾的反義寡聚覈苷痠使用Fugene HD轉染效率無明顯差異.無轉染試劑共培養甲基化、鎖覈痠和肽覈痠脩飾的反義寡聚覈苷痠,肽覈痠脩飾的轉染效率均顯著高于甲基化、鎖覈痠脩飾的反義寡聚覈苷痠.使用Fugene HD轉染的甲基化、鎖覈痠和肽覈痠脩飾的反義寡聚覈苷痠三者之間無明顯毒性差異.鎖覈痠和肽覈痠脩飾的反義寡聚覈苷痠對miR-125b的抑製作用顯著高于甲基化；肽覈痠脩飾的反義寡聚覈苷痠抑製能力及持續性顯著高于甲基化和鎖覈痠脩飾.結論 肽覈痠脩飾的反義寡聚覈苷痠在抑製miRNA錶達能力上具有顯著的高效性、安全性和持續性.
목적 탐토목전상견적갑기화、쇄핵산화태핵산삼충방식수식적반의과취핵감산대miR-125b적억제작용,심구일충고효적、특이성적miRNA표체침묵방식.방법 분별합성갑기화、쇄핵산화태핵산삼충방식수식적반의과취핵감산전염U87세포,류식세포의분석전염효솔,MTT평개세포독성,실시형광정량PCR분석miR-125b표체수평.결과 48 h갑기화、쇄핵산、태핵산수식적반의과취핵감산사용Fugene HD전염효솔무명현차이.무전염시제공배양갑기화、쇄핵산화태핵산수식적반의과취핵감산,태핵산수식적전염효솔균현저고우갑기화、쇄핵산수식적반의과취핵감산.사용Fugene HD전염적갑기화、쇄핵산화태핵산수식적반의과취핵감산삼자지간무명현독성차이.쇄핵산화태핵산수식적반의과취핵감산대miR-125b적억제작용현저고우갑기화；태핵산수식적반의과취핵감산억제능력급지속성현저고우갑기화화쇄핵산수식.결론 태핵산수식적반의과취핵감산재억제miRNA표체능력상구유현저적고효성、안전성화지속성.
