CAJ | 학술논문

以水稻叶片、根和种子为材料,采用高通量快速法提取基因组DNA,用稻瘟病Pita基因分子标记进行检测,获得与预期片段大小一致的特异性条带,对165份育种材料的检测结果与稻瘟病接种鉴定一致.操作方法如下:将少量水稻叶片、根或种子放入200 μL PCR盘中,加入70 μL缓冲液A(含NaOH和Tween20),在PCR仪中加热到95℃,保持10 min,再加入70 μL缓冲液B(Tris-HCl和EDTA),该提取液可以直接用于PCR扩增.该方法具有几个优点:1)成本低,仅用4种化学试剂,共140 μL提取液;2)操作简便,仅需3步,每人每天可以提取上千份样品;3)仪器设备简单,只用常规的PCR仪;4)可直接提取干种子的DNA;5)DNA质量好,能检测出水稻中的抗稻瘟病单基因Pita,并且与稻瘟病接种鉴定结果一致;6)用量少,只需要5～20 mg叶片、20 mg根或半粒籽粒.尤其是检测大量样本的基因型时,此种方法更显得高效便捷.
이수도협편、근화충자위재료,채용고통량쾌속법제취기인조DNA,용도온병Pita기인분자표기진행검측,획득여예기편단대소일치적특이성조대,대165빈육충재료적검측결과여도온병접충감정일치.조작방법여하:장소량수도협편、근혹충자방입200 μL PCR반중,가입70 μL완충액A(함NaOH화Tween20),재PCR의중가열도95℃,보지10 min,재가입70 μL완충액B(Tris-HCl화EDTA),해제취액가이직접용우PCR확증.해방법구유궤개우점:1)성본저,부용4충화학시제,공140 μL제취액;2)조작간편,부수3보,매인매천가이제취상천빈양품;3)의기설비간단,지용상규적PCR의;4)가직접제취간충자적DNA;5)DNA질량호,능검측출수도중적항도온병단기인Pita,병차여도온병접충감정결과일치;6)용량소,지수요5～20 mg협편、20 mg근혹반립자립.우기시검측대량양본적기인형시,차충방법경현득고효편첩.