CAJ | 학술논문

[目的]探索双亚5号亚麻与罗布麻原生质体制备、电融合和培养的适宜条件,为进一步深入进行亚麻与罗布麻体细胞杂交育种研究奠定基础.[方法]以已建立的双亚5号亚麻和罗布麻胚性细胞悬浮系为材料,制备原生质体并进行电融合,培养.[结果]制备亚麻和罗布麻原生质体的最佳渗透剂分别是5.6%蔗糖和0.7 mol/L甘露醇;游离亚麻和罗布麻原生质体的最适酶组合都是0.5% Cellulase Onozuka R-10+1.0% Cellulase Onozuka RS+0.2% Pectolyase Y-23;最佳酶解时间分别是4和3 h;亚麻细胞最佳继代时间是转瓶后的第3 d,在此条件下原生质体存活率均为92.0%,产量分别达到1.24×106和22.4×106个/mL;2种原生质体电融合的最佳参数依次为:AC 8 v/cm,持续25 s-DC 1 500 v/cm,脉冲宽度为60 μs,脉冲次数1次-交流电时间为9 s,重复次数2次.在此条件下融合率达到20.5%.[结论]亚麻与罗布麻原生质体在一定的条件下可实现体细胞杂交.
[목적]탐색쌍아5호아마여라포마원생질체제비、전융합화배양적괄의조건,위진일보심입진행아마여라포마체세포잡교육충연구전정기출.[방법]이이건립적쌍아5호아마화라포마배성세포현부계위재료,제비원생질체병진행전융합,배양.[결과]제비아마화라포마원생질체적최가삼투제분별시5.6%자당화0.7 mol/L감로순;유리아마화라포마원생질체적최괄매조합도시0.5% Cellulase Onozuka R-10+1.0% Cellulase Onozuka RS+0.2% Pectolyase Y-23;최가매해시간분별시4화3 h;아마세포최가계대시간시전병후적제3 d,재차조건하원생질체존활솔균위92.0%,산량분별체도1.24×106화22.4×106개/mL;2충원생질체전융합적최가삼수의차위:AC 8 v/cm,지속25 s-DC 1 500 v/cm,맥충관도위60 μs,맥충차수1차-교류전시간위9 s,중복차수2차.재차조건하융합솔체도20.5%.[결론]아마여라포마원생질체재일정적조건하가실현체세포잡교.