生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2010年
5期
377-380
,共4页
刘莉%刘亚莉%马爽%赵越%安丽%于飞%任亚浩%杨军
劉莉%劉亞莉%馬爽%趙越%安麗%于飛%任亞浩%楊軍
류리%류아리%마상%조월%안려%우비%임아호%양군
细胞因子信号转导抑制因子-3%RNA干扰%慢病毒载体%瘦素%脂肪细胞
細胞因子信號轉導抑製因子-3%RNA榦擾%慢病毒載體%瘦素%脂肪細胞
세포인자신호전도억제인자-3%RNA간우%만병독재체%수소%지방세포
体内存在瘦素抵抗是大多数肥胖者的共同特征,但如何缓解瘦素抵抗目前还无有效方法.通过应用慢病毒载体介导的RNA干扰技术对大鼠脂肪细胞中瘦素信号转导通路的负反馈抑制因子-细胞因子信号转导抑制因子-3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS-3)基因进行敲减,观察其对大鼠重组瘦素作用的反应.研究发现.阴性对照慢病毒和SOCS-3 shRNA慢病毒对成熟脂肪细胞的感染率约为80%.利用real-time PCR和Western blot法检测发现SOCS-3 shRNA慢病毒通过在成熟脂肪细胞内表达shRNA而造成SOCS-3基因在mRNA和蛋白水平的敲减,有效率分别为72%和57%;经50 nmol/L瘦素处理6 h后,感染阴性对照病毒的脂肪细胞SOCS-3 mRNA表达有明显升高(P<0.05),而感染SOCS-3 shRNA慢病毒的脂肪细胞SOCS-3 mRNA表达则无明显变化(P>0.05).结果表明,利用SOCS-3 shRNA慢病毒去敲减脂肪细胞中SOCS-3的表达可能对于解除肥胖者外周瘦素抵抗具有一定的作用.
體內存在瘦素牴抗是大多數肥胖者的共同特徵,但如何緩解瘦素牴抗目前還無有效方法.通過應用慢病毒載體介導的RNA榦擾技術對大鼠脂肪細胞中瘦素信號轉導通路的負反饋抑製因子-細胞因子信號轉導抑製因子-3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS-3)基因進行敲減,觀察其對大鼠重組瘦素作用的反應.研究髮現.陰性對照慢病毒和SOCS-3 shRNA慢病毒對成熟脂肪細胞的感染率約為80%.利用real-time PCR和Western blot法檢測髮現SOCS-3 shRNA慢病毒通過在成熟脂肪細胞內錶達shRNA而造成SOCS-3基因在mRNA和蛋白水平的敲減,有效率分彆為72%和57%;經50 nmol/L瘦素處理6 h後,感染陰性對照病毒的脂肪細胞SOCS-3 mRNA錶達有明顯升高(P<0.05),而感染SOCS-3 shRNA慢病毒的脂肪細胞SOCS-3 mRNA錶達則無明顯變化(P>0.05).結果錶明,利用SOCS-3 shRNA慢病毒去敲減脂肪細胞中SOCS-3的錶達可能對于解除肥胖者外週瘦素牴抗具有一定的作用.
체내존재수소저항시대다수비반자적공동특정,단여하완해수소저항목전환무유효방법.통과응용만병독재체개도적RNA간우기술대대서지방세포중수소신호전도통로적부반궤억제인자-세포인자신호전도억제인자-3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS-3)기인진행고감,관찰기대대서중조수소작용적반응.연구발현.음성대조만병독화SOCS-3 shRNA만병독대성숙지방세포적감염솔약위80%.이용real-time PCR화Western blot법검측발현SOCS-3 shRNA만병독통과재성숙지방세포내표체shRNA이조성SOCS-3기인재mRNA화단백수평적고감,유효솔분별위72%화57%;경50 nmol/L수소처리6 h후,감염음성대조병독적지방세포SOCS-3 mRNA표체유명현승고(P<0.05),이감염SOCS-3 shRNA만병독적지방세포SOCS-3 mRNA표체칙무명현변화(P>0.05).결과표명,이용SOCS-3 shRNA만병독거고감지방세포중SOCS-3적표체가능대우해제비반자외주수소저항구유일정적작용.
