东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2010年
10期
108-115
,共8页
张红宇%孟祥晨%姜博%张伟钦
張紅宇%孟祥晨%薑博%張偉欽
장홍우%맹상신%강박%장위흠
致泻性大肠埃希氏菌%Taqman%三重实时PCR%原料乳
緻瀉性大腸埃希氏菌%Taqman%三重實時PCR%原料乳
치사성대장애희씨균%Taqman%삼중실시PCR%원료유
建立可对原料乳中致泻性大肠埃希氏菌(包括肠致病性大肠埃希氏菌、肠侵袭性大肠埃希氏菌和肠产毒性大肠埃希氏菌)同时进行快速检测的Taqman三重实时PCR方法.以致病菌中常见的eae、ipaH和It基因为目的片段,选择3种特异性引物和Taqman探针进行三重实时PCR扩增,研究反应的特异性、检测限和重复性,并用所建立的方法对38份原料乳进行检测.结果表明,扩增曲线形态良好,对原料乳中其他常见致病菌无交叉反应.对含致病菌为1 cfu·mL-1的乳样经2 h增菌处理后检测结果呈阳性,对原料乳样重复性检测的CV值均小于5%.完成全部检测过程只需大约6 h.该方法快速准确,可应用于原料乳中致泻性大肠埃希氏菌的快速检测和污染调查.
建立可對原料乳中緻瀉性大腸埃希氏菌(包括腸緻病性大腸埃希氏菌、腸侵襲性大腸埃希氏菌和腸產毒性大腸埃希氏菌)同時進行快速檢測的Taqman三重實時PCR方法.以緻病菌中常見的eae、ipaH和It基因為目的片段,選擇3種特異性引物和Taqman探針進行三重實時PCR擴增,研究反應的特異性、檢測限和重複性,併用所建立的方法對38份原料乳進行檢測.結果錶明,擴增麯線形態良好,對原料乳中其他常見緻病菌無交扠反應.對含緻病菌為1 cfu·mL-1的乳樣經2 h增菌處理後檢測結果呈暘性,對原料乳樣重複性檢測的CV值均小于5%.完成全部檢測過程隻需大約6 h.該方法快速準確,可應用于原料乳中緻瀉性大腸埃希氏菌的快速檢測和汙染調查.
건립가대원료유중치사성대장애희씨균(포괄장치병성대장애희씨균、장침습성대장애희씨균화장산독성대장애희씨균)동시진행쾌속검측적Taqman삼중실시PCR방법.이치병균중상견적eae、ipaH화It기인위목적편단,선택3충특이성인물화Taqman탐침진행삼중실시PCR확증,연구반응적특이성、검측한화중복성,병용소건립적방법대38빈원료유진행검측.결과표명,확증곡선형태량호,대원료유중기타상견치병균무교차반응.대함치병균위1 cfu·mL-1적유양경2 h증균처리후검측결과정양성,대원료유양중복성검측적CV치균소우5%.완성전부검측과정지수대약6 h.해방법쾌속준학,가응용우원료유중치사성대장애희씨균적쾌속검측화오염조사.
