热带病与寄生虫学
熱帶病與寄生蟲學
열대병여기생충학
TROPICAL DISEASES AND PARASITOLOGY
2011年
1期
1-3
,共3页
王晓春%许礼发%张超%李朝品
王曉春%許禮髮%張超%李朝品
왕효춘%허례발%장초%리조품
乙型肝炎病毒%HBcAg%真核表达%酵母细胞
乙型肝炎病毒%HBcAg%真覈錶達%酵母細胞
을형간염병독%HBcAg%진핵표체%효모세포
目的 构建乙型肝炎病毒核心抗原真核表达载体,并在酵母细胞中进行表达. 方法 以实验室保存质粒为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增HBcAg基因,克隆到pGEM-T载体.测序正确后酶切并连接至酵母表达载体pGBKT7中,转化酵母菌AH109,在色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp/Kana)上筛选阳性菌落后大量表达并提取重组蛋白,再进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果 成功构建酵母表达载体pGBKT7-HBcAg,Western blot结果显示重组蛋白在酵母细胞中正确表达.结论 利用真核表达载体在酵母细胞中成功表达HBcAg蛋白,为研究HBV合并代谢性疾病的机制奠定了基础.
目的 構建乙型肝炎病毒覈心抗原真覈錶達載體,併在酵母細胞中進行錶達. 方法 以實驗室保存質粒為模闆,通過聚閤酶鏈式反應(PCR)擴增HBcAg基因,剋隆到pGEM-T載體.測序正確後酶切併連接至酵母錶達載體pGBKT7中,轉化酵母菌AH109,在色氨痠缺陷型培養基(SD/-Trp/Kana)上篩選暘性菌落後大量錶達併提取重組蛋白,再進行SDS-PAGE和Western blot分析.結果 成功構建酵母錶達載體pGBKT7-HBcAg,Western blot結果顯示重組蛋白在酵母細胞中正確錶達.結論 利用真覈錶達載體在酵母細胞中成功錶達HBcAg蛋白,為研究HBV閤併代謝性疾病的機製奠定瞭基礎.
목적 구건을형간염병독핵심항원진핵표체재체,병재효모세포중진행표체. 방법 이실험실보존질립위모판,통과취합매련식반응(PCR)확증HBcAg기인,극륭도pGEM-T재체.측서정학후매절병련접지효모표체재체pGBKT7중,전화효모균AH109,재색안산결함형배양기(SD/-Trp/Kana)상사선양성균락후대량표체병제취중조단백,재진행SDS-PAGE화Western blot분석.결과 성공구건효모표체재체pGBKT7-HBcAg,Western blot결과현시중조단백재효모세포중정학표체.결론 이용진핵표체재체재효모세포중성공표체HBcAg단백,위연구HBV합병대사성질병적궤제전정료기출.
