中华眼科杂志
中華眼科雜誌
중화안과잡지
Chinese Journal of Ophthalmology
2009年
3期
210-215
,共6页
安建斌%马景学%刘丹岩%高彦军%盛梦怡%王红霞%刘丽娅
安建斌%馬景學%劉丹巖%高彥軍%盛夢怡%王紅霞%劉麗婭
안건빈%마경학%류단암%고언군%성몽이%왕홍하%류려아
姜黄素%膜电位,线粒体%钙%色素上皮,眼
薑黃素%膜電位,線粒體%鈣%色素上皮,眼
강황소%막전위,선립체%개%색소상피,안
Curcumin%Membrance potential,mitochondrial%Calcium%Pigment epithelium of eye
目的 探讨姜黄素对兔视网膜色素上皮细胞(RPE)DNA含量(凋亡率)、线粒体膜电位(Aψm)和胞质内钙离子(Ca2+)的影响.方法 实验研究.选取体外培养的第4代RPE细胞进行试验,分为姜黄素组和空白对照组(10% FBS-DMEM含二甲基业砜0.5‰),姜黄素组设10、15、20 mg/L 3个质量浓度.噻唑蓝(MTT)法检测姜黄素10、15、20 mg/L 3个质量浓度分别作用24、48、72及96 h后对体外培养的RPE细胞增殖72及96 h后对体外培养的RPE细胞增殖的抑制率.相关回归分析计算24、48、72及96 h的半数抑制率(IC50)剂量.流式细胞仪检测姜黄素15 mg/L作用8、24、48及72 h,后RPE细胞DNA含量(凋亡率)、△Ψm和胞质内Ca2+的变化.对抑制率分别在同浓度不同时间组间、同时间不同浓度组间进行方差分析(多个样本问两两比较);采用相关回归分析计算姜黄素各时间段半数抑制率剂最;对凋亡率、线粒体△Ψm、细胞质内Ca2+等对照组与姜黄素组间进行两独市样本t检验;对凋亡率、线粒体△Ψm、细胞质内Ca2+等姜黄素不同时间组间进行方差分析(多个样本间两两比较).结果姜黄素对RPE细胞有明显抑制作用,呈时间和剂量依赖件.姜黄素在24、48、72及96 h对RPE细胞的IC50分别是29.31、17.50、13.24及10.99 mg/L.姜黄素作用8、24、48、72 h后,RPE细胞质内Ca2+浓度明显升高与空白对照组相比,差异有统计学意义(t=7.50,10.61,20.74,21.14;P＜0.01)△Ψm明显下降,与对照组相比均有统计学意义(t=7.50,11.74,14.91,15.29;P＜0.01).姜黄素作用8 h DNA含量未见明显下降,24、48及72 h DNA含量明显下降(即凋亡率升高),与空白对照组相比均有统计学意义(t=10.00,14.68,13.68;P＜0.01).结论姜黄素可以使RPE细胞质内Ca2+浓度升高,△Ψm下降,进而使DNA含量明显下降,诱导RPE细胞凋亡.姜黄素可以有效抑制RPE细胞增殖,有望成为防治增生性玻璃体视网膜病变的理想天然药物.(中华眼科杂志.2009,45:210-215)
目的 探討薑黃素對兔視網膜色素上皮細胞(RPE)DNA含量(凋亡率)、線粒體膜電位(Aψm)和胞質內鈣離子(Ca2+)的影響.方法 實驗研究.選取體外培養的第4代RPE細胞進行試驗,分為薑黃素組和空白對照組(10% FBS-DMEM含二甲基業砜0.5‰),薑黃素組設10、15、20 mg/L 3箇質量濃度.噻唑藍(MTT)法檢測薑黃素10、15、20 mg/L 3箇質量濃度分彆作用24、48、72及96 h後對體外培養的RPE細胞增殖72及96 h後對體外培養的RPE細胞增殖的抑製率.相關迴歸分析計算24、48、72及96 h的半數抑製率(IC50)劑量.流式細胞儀檢測薑黃素15 mg/L作用8、24、48及72 h,後RPE細胞DNA含量(凋亡率)、△Ψm和胞質內Ca2+的變化.對抑製率分彆在同濃度不同時間組間、同時間不同濃度組間進行方差分析(多箇樣本問兩兩比較);採用相關迴歸分析計算薑黃素各時間段半數抑製率劑最;對凋亡率、線粒體△Ψm、細胞質內Ca2+等對照組與薑黃素組間進行兩獨市樣本t檢驗;對凋亡率、線粒體△Ψm、細胞質內Ca2+等薑黃素不同時間組間進行方差分析(多箇樣本間兩兩比較).結果薑黃素對RPE細胞有明顯抑製作用,呈時間和劑量依賴件.薑黃素在24、48、72及96 h對RPE細胞的IC50分彆是29.31、17.50、13.24及10.99 mg/L.薑黃素作用8、24、48、72 h後,RPE細胞質內Ca2+濃度明顯升高與空白對照組相比,差異有統計學意義(t=7.50,10.61,20.74,21.14;P＜0.01)△Ψm明顯下降,與對照組相比均有統計學意義(t=7.50,11.74,14.91,15.29;P＜0.01).薑黃素作用8 h DNA含量未見明顯下降,24、48及72 h DNA含量明顯下降(即凋亡率升高),與空白對照組相比均有統計學意義(t=10.00,14.68,13.68;P＜0.01).結論薑黃素可以使RPE細胞質內Ca2+濃度升高,△Ψm下降,進而使DNA含量明顯下降,誘導RPE細胞凋亡.薑黃素可以有效抑製RPE細胞增殖,有望成為防治增生性玻璃體視網膜病變的理想天然藥物.(中華眼科雜誌.2009,45:210-215)
목적 탐토강황소대토시망막색소상피세포(RPE)DNA함량(조망솔)、선립체막전위(Aψm)화포질내개리자(Ca2+)적영향.방법 실험연구.선취체외배양적제4대RPE세포진행시험,분위강황소조화공백대조조(10% FBS-DMEM함이갑기업풍0.5‰),강황소조설10、15、20 mg/L 3개질량농도.새서람(MTT)법검측강황소10、15、20 mg/L 3개질량농도분별작용24、48、72급96 h후대체외배양적RPE세포증식72급96 h후대체외배양적RPE세포증식적억제솔.상관회귀분석계산24、48、72급96 h적반수억제솔(IC50)제량.류식세포의검측강황소15 mg/L작용8、24、48급72 h,후RPE세포DNA함량(조망솔)、△Ψm화포질내Ca2+적변화.대억제솔분별재동농도불동시간조간、동시간불동농도조간진행방차분석(다개양본문량량비교);채용상관회귀분석계산강황소각시간단반수억제솔제최;대조망솔、선립체△Ψm、세포질내Ca2+등대조조여강황소조간진행량독시양본t검험;대조망솔、선립체△Ψm、세포질내Ca2+등강황소불동시간조간진행방차분석(다개양본간량량비교).결과강황소대RPE세포유명현억제작용,정시간화제량의뢰건.강황소재24、48、72급96 h대RPE세포적IC50분별시29.31、17.50、13.24급10.99 mg/L.강황소작용8、24、48、72 h후,RPE세포질내Ca2+농도명현승고여공백대조조상비,차이유통계학의의(t=7.50,10.61,20.74,21.14;P＜0.01)△Ψm명현하강,여대조조상비균유통계학의의(t=7.50,11.74,14.91,15.29;P＜0.01).강황소작용8 h DNA함량미견명현하강,24、48급72 h DNA함량명현하강(즉조망솔승고),여공백대조조상비균유통계학의의(t=10.00,14.68,13.68;P＜0.01).결론강황소가이사RPE세포질내Ca2+농도승고,△Ψm하강,진이사DNA함량명현하강,유도RPE세포조망.강황소가이유효억제RPE세포증식,유망성위방치증생성파리체시망막병변적이상천연약물.(중화안과잡지.2009,45:210-215)
Objective To investigate the Change of DNA content(apoptosis rate),mitochondrial transmembrane potential(△Ψm)and calcium(Ca2+)of rabbit retinal pigment epithelial(RPE)cells cultured with curcumin.Methods It was an experimental study.The RPE cells were dissociated from rabbit eyes and cuhured.The RPE cells in the 4th passage were divided into 2 groups:curcumin group and control group(10% FBS-EMI)M contains 0.05% dimethyl sulfoxide).The curcumin group contained 3 mass concentration:10 mg/L,15 mg/L and 20 mg/L.The MTT assay was used to evaluate the inhibition effect of RPE cells cultured with curcumin after 24 h,48 h,72 h and 96 h respectively.The IC50 value in 24 h,48 h,72 h and 96 h were gotten by Linear Regression.Flow cytometry was performed to detect the change of DNA content(apoptosis rate),△Ψm and Ca2+ of RPE cells cultured with curcomin(15 mg/L)after 8 h,24 h,48 h and 72 h respectively.Results RPE cells were significantly inhibited by curcumin in a dose dependent and time dependent manner.The IC50 value of curcumin at 24 h,48 h,72 h and 96 h was 29.31 mg/L,17.50 mg/L,13.24 mg/L and 10.99 mg/L respectively.Ca22+ was significantly increased at 8 h,24 h,48 h and 72 h after cultured with curcumin(15 mg/L)than that of the control group respectively(t=7.50,10.61,20.74,21.14,P＜0.01),and △Ψm was significantly decreased at 8 h,24 h,48 h and 72 h after cultured with curcumin(15 mg/L)than that of the control group respectively(t=7.50,11.74,14.91,15.29,P＜0.01).There was no change of DNA content in RPE cells at 8h after cultured with curcumin(15 mg/L),but significantly lower than that of the control group at 24 h,48 h and 72 h respectively(t=10.00,14.68,13.68,P＜0.01).Conclusion The apeptosis of RPE cells induced by curcumin is cansed by increase of Ca2+ and decrease of △Ψsm that causes decrease of DNA content.The RPE cells are significantly inhibited by curcumin,which may become a potential drug to prevent and treat proliferative vitreoretinopathy.(Chin J Ophthalmol,2009,45:210-215)
