生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2001年
2期
210-215
,共6页
党昕%杨晶鑫%茹强%袁洪生%茹炳根
黨昕%楊晶鑫%茹彊%袁洪生%茹炳根
당흔%양정흠%여강%원홍생%여병근
纤维蛋白%纤溶酶原%单链尿激酶型纤溶酶原激活剂突变体%动力学
纖維蛋白%纖溶酶原%單鏈尿激酶型纖溶酶原激活劑突變體%動力學
섬유단백%섬용매원%단련뇨격매형섬용매원격활제돌변체%동역학
fibrin%plasminogen%mutant of single-chain urokinase -type plasminogen activator%kinetics
反应体系中存在的纤维蛋白(fibrin)对尿激酶(UK)、scu-PA以及组织 型纤溶酶原激活剂(t-PA)激活纤溶酶原(plasminogen)的反应有不同的作用:UK、t-PA激活plasminogen的反应可被反应体系中存在的fibrin所加强;fibrin对scu-PA激活 plasminogen反应的动力学常数无明显影响;但对小分子质量scu-PA与单链抗体的嵌合分子 激活plasminogen的反应起明显的抑制作用.为确定反应体系中存在的fibrin对scu-PA的K区 插 入突变体-InB激活plasminogen反应的影响,测定了在反应体系中存在fibrin的情况下的In B激活plasminogen反应的Kfibrinm以及kfibrincat.Kfibrinm=4.2 μmol*L-1,远远大于无fibrin时的Km=0.379 μmol*L-1,说明有fibrin存在时突变体InB与天然底物plasminogen的亲和 性降低了.kfibrincat=0.107 s-1,也远远大于无fibrin时kcat=0.0165 s-1,说明有fibrin存在时突变体InB对plasminogen的反 应活性增强了.原因可能是:与fibrin结合的plasminogen的构象发生了有利于被纤溶酶原激 活剂水解的变化.
反應體繫中存在的纖維蛋白(fibrin)對尿激酶(UK)、scu-PA以及組織 型纖溶酶原激活劑(t-PA)激活纖溶酶原(plasminogen)的反應有不同的作用:UK、t-PA激活plasminogen的反應可被反應體繫中存在的fibrin所加彊;fibrin對scu-PA激活 plasminogen反應的動力學常數無明顯影響;但對小分子質量scu-PA與單鏈抗體的嵌閤分子 激活plasminogen的反應起明顯的抑製作用.為確定反應體繫中存在的fibrin對scu-PA的K區 插 入突變體-InB激活plasminogen反應的影響,測定瞭在反應體繫中存在fibrin的情況下的In B激活plasminogen反應的Kfibrinm以及kfibrincat.Kfibrinm=4.2 μmol*L-1,遠遠大于無fibrin時的Km=0.379 μmol*L-1,說明有fibrin存在時突變體InB與天然底物plasminogen的親和 性降低瞭.kfibrincat=0.107 s-1,也遠遠大于無fibrin時kcat=0.0165 s-1,說明有fibrin存在時突變體InB對plasminogen的反 應活性增彊瞭.原因可能是:與fibrin結閤的plasminogen的構象髮生瞭有利于被纖溶酶原激 活劑水解的變化.
반응체계중존재적섬유단백(fibrin)대뇨격매(UK)、scu-PA이급조직 형섬용매원격활제(t-PA)격활섬용매원(plasminogen)적반응유불동적작용:UK、t-PA격활plasminogen적반응가피반응체계중존재적fibrin소가강;fibrin대scu-PA격활 plasminogen반응적동역학상수무명현영향;단대소분자질량scu-PA여단련항체적감합분자 격활plasminogen적반응기명현적억제작용.위학정반응체계중존재적fibrin대scu-PA적K구 삽 입돌변체-InB격활plasminogen반응적영향,측정료재반응체계중존재fibrin적정황하적In B격활plasminogen반응적Kfibrinm이급kfibrincat.Kfibrinm=4.2 μmol*L-1,원원대우무fibrin시적Km=0.379 μmol*L-1,설명유fibrin존재시돌변체InB여천연저물plasminogen적친화 성강저료.kfibrincat=0.107 s-1,야원원대우무fibrin시kcat=0.0165 s-1,설명유fibrin존재시돌변체InB대plasminogen적반 응활성증강료.원인가능시:여fibrin결합적plasminogen적구상발생료유리우피섬용매원격 활제수해적변화.
Because the influence of fibrin on the reaction of plasm inogen activation by various plasminogen activators is different, the kinetic co nstant of the reaction of plasminogen activation catalyzed by InB with and witho ut fibrin were detected. The result is: Kfibrinm=4.2 μmol*L -1,greater than the normal Km=0.379 μmol*L-1; kfib rincat=0.107 s-1,greater than the normal kcat=0.0165 s-1. The results suggest that existence of fibrin in the reaction system of plasminogen activation depress the affinity between InB and plasminog en, but accelerates the hydrolysis of plasminogen by InB. The count up effect is inhibition.