中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2004年
7期
93-97
,共5页
张素芳%贾赟%蔡梅红%仇妍虹%陈溥言
張素芳%賈赟%蔡梅紅%仇妍虹%陳溥言
장소방%가빈%채매홍%구연홍%진부언
抗菌肽%基因改造%SOE%毕赤酵母%分泌表达
抗菌肽%基因改造%SOE%畢赤酵母%分泌錶達
항균태%기인개조%SOE%필적효모%분비표체
选用毕赤酵母偏爱密码子,设计合成了新型抗菌肽基因.所合成的magainin基因和cecA-mil杂合肽基因全长分别为101bp和60bp,并在其N端引入kex2裂解位点,以保证表达抗菌肽具有天然N端.其中,cecA-mil杂合肽基因根据cecropinA N端第1～7个氨基酸残基、melittin N端第5～12个氨基酸残基所设计合成.基因分别克隆入pPICZα-A质粒,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-mag和pPICZα-A-CM.在AOX1(醇氧化酶)启动子调控下,类似天然抗菌肽大小的magainin及cecA-mil蛋白获得分泌表达,其表达量分别为105mg/L和118mg/L.初步抑菌活性测定,显示两者对金黄色葡萄球菌及E.coli DH5α有较好的抑杀活性.
選用畢赤酵母偏愛密碼子,設計閤成瞭新型抗菌肽基因.所閤成的magainin基因和cecA-mil雜閤肽基因全長分彆為101bp和60bp,併在其N耑引入kex2裂解位點,以保證錶達抗菌肽具有天然N耑.其中,cecA-mil雜閤肽基因根據cecropinA N耑第1～7箇氨基痠殘基、melittin N耑第5～12箇氨基痠殘基所設計閤成.基因分彆剋隆入pPICZα-A質粒,構建分泌型重組酵母錶達載體pPICZα-A-mag和pPICZα-A-CM.在AOX1(醇氧化酶)啟動子調控下,類似天然抗菌肽大小的magainin及cecA-mil蛋白穫得分泌錶達,其錶達量分彆為105mg/L和118mg/L.初步抑菌活性測定,顯示兩者對金黃色葡萄毬菌及E.coli DH5α有較好的抑殺活性.
선용필적효모편애밀마자,설계합성료신형항균태기인.소합성적magainin기인화cecA-mil잡합태기인전장분별위101bp화60bp,병재기N단인입kex2렬해위점,이보증표체항균태구유천연N단.기중,cecA-mil잡합태기인근거cecropinA N단제1～7개안기산잔기、melittin N단제5～12개안기산잔기소설계합성.기인분별극륭입pPICZα-A질립,구건분비형중조효모표체재체pPICZα-A-mag화pPICZα-A-CM.재AOX1(순양화매)계동자조공하,유사천연항균태대소적magainin급cecA-mil단백획득분비표체,기표체량분별위105mg/L화118mg/L.초보억균활성측정,현시량자대금황색포도구균급E.coli DH5α유교호적억살활성.
