重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2005年
5期
686-688,693
,共4页
杨清浩%王祥卫%金燕%张立新
楊清浩%王祥衛%金燕%張立新
양청호%왕상위%금연%장립신
MUC1抗原%B细胞表位%模拟表位%噬菌体随机7肽库%抗体
MUC1抗原%B細胞錶位%模擬錶位%噬菌體隨機7肽庫%抗體
MUC1항원%B세포표위%모의표위%서균체수궤7태고%항체
目的预测MUC1抗原的B细胞表位,从噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟位.方法联合运用多种方法对MUC1的二级结构和表面特性,如理化性质、亲水性、可塑性、溶剂可及性及免疫原性等方面进行分析,预测MUC1的抗原表位.利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列,竞争性抑制实验鉴定阳性噬菌体克隆.结果MUC1存在有多个潜在的抗原表位位点,可能的蛋白质抗原表位区域:1-10,24-54,65-77,84-91,108-134,140-156,159-174,179-196,199-210,220-233,237-265,270-299,316-337,351-362,369-396,411-420,445-502.经3轮筛选,获得了30个阳性克隆,DNA序列分析并推导出氨基酸序列:TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP 4个噬菌体展示肽克隆抑制率均在50%以上.结论应用多参数预测MUC1抗原的B细胞表位,为进一步研究MUC1结构和功能、选择表达新型MUC1分子奠定了基础.所得序列TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP模拟MUC1抗原表位.
目的預測MUC1抗原的B細胞錶位,從噬菌體隨機多肽文庫篩選及鑒定MUC1抗原的模擬位.方法聯閤運用多種方法對MUC1的二級結構和錶麵特性,如理化性質、親水性、可塑性、溶劑可及性及免疫原性等方麵進行分析,預測MUC1的抗原錶位.利用純化穫得的BC2抗體篩選噬菌體隨機7肽庫,夾心ELISA分析噬菌體剋隆,測定暘性剋隆DNA序列,競爭性抑製實驗鑒定暘性噬菌體剋隆.結果MUC1存在有多箇潛在的抗原錶位位點,可能的蛋白質抗原錶位區域:1-10,24-54,65-77,84-91,108-134,140-156,159-174,179-196,199-210,220-233,237-265,270-299,316-337,351-362,369-396,411-420,445-502.經3輪篩選,穫得瞭30箇暘性剋隆,DNA序列分析併推導齣氨基痠序列:TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP 4箇噬菌體展示肽剋隆抑製率均在50%以上.結論應用多參數預測MUC1抗原的B細胞錶位,為進一步研究MUC1結構和功能、選擇錶達新型MUC1分子奠定瞭基礎.所得序列TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP模擬MUC1抗原錶位.
목적예측MUC1항원적B세포표위,종서균체수궤다태문고사선급감정MUC1항원적모의위.방법연합운용다충방법대MUC1적이급결구화표면특성,여이화성질、친수성、가소성、용제가급성급면역원성등방면진행분석,예측MUC1적항원표위.이용순화획득적BC2항체사선서균체수궤7태고,협심ELISA분석서균체극륭,측정양성극륭DNA서렬,경쟁성억제실험감정양성서균체극륭.결과MUC1존재유다개잠재적항원표위위점,가능적단백질항원표위구역:1-10,24-54,65-77,84-91,108-134,140-156,159-174,179-196,199-210,220-233,237-265,270-299,316-337,351-362,369-396,411-420,445-502.경3륜사선,획득료30개양성극륭,DNA서렬분석병추도출안기산서렬:TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP급LAPDFRP 4개서균체전시태극륭억제솔균재50%이상.결론응용다삼수예측MUC1항원적B세포표위,위진일보연구MUC1결구화공능、선택표체신형MUC1분자전정료기출.소득서렬TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP급LAPDFRP모의MUC1항원표위.
