CAJ | 학술논문

目的:探讨人脐血造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cells,HSC/HPC)在适合临床移植条件下体外扩增以获得理想的造血干/祖细胞数量的最佳细胞因子组合及扩增时间,为脐血经体外扩增后成为高体重受者克服脐血移植细胞数量不足及缩短植入时间提供客观指标.方法:采集脐血4份,分离单个核细胞(mononuclear,MNC),免疫磁珠分选(MiniMACS)CD;细胞,分别在细胞因子组合为A:SCF+FL+TPO、B:SCF+FL+TPO+IL-3及C:SCF+FL+TPO+G-CSF支持的无血清、无基质的液体培养基中扩增培养14 d,收集扩增前、扩增后7 d及14d的细胞进行细胞表型分析、半固体集落培养及端粒酶活性分析.结果:在含细胞因子IL-3组扩增培养7 d及14d,均获得了总有核细胞数(total nucleated cells,TNC)及集落形成细胞(colony-forming cell,CFC)最大的扩增倍数.扩增7 d,IL·3组的CD+34细胞扩增倍数为(10.11±7.21)倍,较其他两组稍低,但无统计学意义;三组CD+33细胞、CD+41细胞、CD+71细胞也得到了较大程度的扩增,IL-3组高于其他两组;3组扩增后的细胞端粒酶活性均上调,7 d时A值达最高,IL-3组低于G-CSF组(P=0.008).随着扩增时间的延长,扩增后的细胞端粒酶活性下降;CD+34细胞占TNC的比例也明显下降,部分定向祖细胞的比例也出现先升高后下降的现象.结论:在SCF、FL、TPO及IL-3存在下,单份脐血的部分体外扩增7 d,可获得较大量的TNC及不同阶段的HPC,可配合支持长期植入的非扩增的脐血细胞加速移植早期的植入,又不影响长期植入而满足成人移植的需要.扩增时间以7 d为宜.在SCF、FL、TPO存在下,IL-3的协同扩增和促分化能力大于G-CSF.
목적:탐토인제혈조혈간/조세포(hematopoietic stem/progenitor cells,HSC/HPC)재괄합림상이식조건하체외확증이획득이상적조혈간/조세포수량적최가세포인자조합급확증시간,위제혈경체외확증후성위고체중수자극복제혈이식세포수량불족급축단식입시간제공객관지표.방법:채집제혈4빈,분리단개핵세포(mononuclear,MNC),면역자주분선(MiniMACS)CD;세포,분별재세포인자조합위A:SCF+FL+TPO、B:SCF+FL+TPO+IL-3급C:SCF+FL+TPO+G-CSF지지적무혈청、무기질적액체배양기중확증배양14 d,수집확증전、확증후7 d급14d적세포진행세포표형분석、반고체집락배양급단립매활성분석.결과:재함세포인자IL-3조확증배양7 d급14d,균획득료총유핵세포수(total nucleated cells,TNC)급집락형성세포(colony-forming cell,CFC)최대적확증배수.확증7 d,IL·3조적CD+34세포확증배수위(10.11±7.21)배,교기타량조초저,단무통계학의의;삼조CD+33세포、CD+41세포、CD+71세포야득도료교대정도적확증,IL-3조고우기타량조;3조확증후적세포단립매활성균상조,7 d시A치체최고,IL-3조저우G-CSF조(P=0.008).수착확증시간적연장,확증후적세포단립매활성하강;CD+34세포점TNC적비례야명현하강,부분정향조세포적비례야출현선승고후하강적현상.결론:재SCF、FL、TPO급IL-3존재하,단빈제혈적부분체외확증7 d,가획득교대량적TNC급불동계단적HPC,가배합지지장기식입적비확증적제혈세포가속이식조기적식입,우불영향장기식입이만족성인이식적수요.확증시간이7 d위의.재SCF、FL、TPO존재하,IL-3적협동확증화촉분화능력대우G-CSF.