肾脏病与透析肾移植杂志
腎髒病與透析腎移植雜誌
신장병여투석신이식잡지
CHINESE JOURNAL OF NEPHROLOGY,DIALYSIS & TRANSPLANTATION
2008年
6期
529-533
,共5页
陈永熙%王伟铭%李娅%陈楠
陳永熙%王偉銘%李婭%陳楠
진영희%왕위명%리아%진남
转化生长因子β%骨成形蛋白7%细胞外基质%人肾小管上皮细胞
轉化生長因子β%骨成形蛋白7%細胞外基質%人腎小管上皮細胞
전화생장인자β%골성형단백7%세포외기질%인신소관상피세포
目的:观察骨成形蛋白7(BMP-7)拮抗转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)细胞外基质(ECM)分泌作用,并对相关信号通路进行研究,对BMP-7抗纤维化机制进行深入探讨. 方法:将不同浓度BMP-7预处理HK-2细胞,随后予以5 ng/ml TGF-β1刺激,利用荧光实时定量PCR和Western印迹检测ECM表达、利用Western印迹和凝胶迁移滞后实验(EMSA)检测相关信号通路蛋白表达. 结果:荧光实时定量PCR和Western印迹结果表明,BMP-7可以浓度依赖方式下调TGF-β1刺激后HK-2细胞Ⅰ型胶原,Ⅲ型胶原,纤维连接蛋白在mRNA和蛋白水平表达.TGF-β1可促进HK-2细胞Smad 2、Smad 3磷酸化.但TGF-β1上调的Smad 2、Smad 3磷酸化可被BMP-7抑制,差异有统计学意义(P<0.05和P<0.01).EMSA结果表明,BMP-7则可抑制TGF-β1上调的NF-KB活性. 结论:BMP-7可通过抑制Smad 2/3磷酸化、抑制NF-kB的DNA结合活性达到阻断TGF-β1诱导HK-2分泌ECM的效应.
目的:觀察骨成形蛋白7(BMP-7)拮抗轉化生長因子β1(TGF-β1)誘導人腎小管上皮細胞(HK-2)細胞外基質(ECM)分泌作用,併對相關信號通路進行研究,對BMP-7抗纖維化機製進行深入探討. 方法:將不同濃度BMP-7預處理HK-2細胞,隨後予以5 ng/ml TGF-β1刺激,利用熒光實時定量PCR和Western印跡檢測ECM錶達、利用Western印跡和凝膠遷移滯後實驗(EMSA)檢測相關信號通路蛋白錶達. 結果:熒光實時定量PCR和Western印跡結果錶明,BMP-7可以濃度依賴方式下調TGF-β1刺激後HK-2細胞Ⅰ型膠原,Ⅲ型膠原,纖維連接蛋白在mRNA和蛋白水平錶達.TGF-β1可促進HK-2細胞Smad 2、Smad 3燐痠化.但TGF-β1上調的Smad 2、Smad 3燐痠化可被BMP-7抑製,差異有統計學意義(P<0.05和P<0.01).EMSA結果錶明,BMP-7則可抑製TGF-β1上調的NF-KB活性. 結論:BMP-7可通過抑製Smad 2/3燐痠化、抑製NF-kB的DNA結閤活性達到阻斷TGF-β1誘導HK-2分泌ECM的效應.
목적:관찰골성형단백7(BMP-7)길항전화생장인자β1(TGF-β1)유도인신소관상피세포(HK-2)세포외기질(ECM)분비작용,병대상관신호통로진행연구,대BMP-7항섬유화궤제진행심입탐토. 방법:장불동농도BMP-7예처리HK-2세포,수후여이5 ng/ml TGF-β1자격,이용형광실시정량PCR화Western인적검측ECM표체、이용Western인적화응효천이체후실험(EMSA)검측상관신호통로단백표체. 결과:형광실시정량PCR화Western인적결과표명,BMP-7가이농도의뢰방식하조TGF-β1자격후HK-2세포Ⅰ형효원,Ⅲ형효원,섬유련접단백재mRNA화단백수평표체.TGF-β1가촉진HK-2세포Smad 2、Smad 3린산화.단TGF-β1상조적Smad 2、Smad 3린산화가피BMP-7억제,차이유통계학의의(P<0.05화P<0.01).EMSA결과표명,BMP-7칙가억제TGF-β1상조적NF-KB활성. 결론:BMP-7가통과억제Smad 2/3린산화、억제NF-kB적DNA결합활성체도조단TGF-β1유도HK-2분비ECM적효응.
