水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2010年
6期
1166-1171
,共6页
蛙虹彩病毒%RGV-12L基因%原核表达%RT-PCR%Western blotting%免疫荧光
蛙虹綵病毒%RGV-12L基因%原覈錶達%RT-PCR%Western blotting%免疫熒光
와홍채병독%RGV-12L기인%원핵표체%RT-PCR%Western blotting%면역형광
从蛙虹彩病毒(Rana grylio virus,RGV)中克隆出一个虹彩病毒科的序列保守基因RGV-12L,序列分析表明该基因全长894 bp,编码一个含297个氨基酸的多肽,分子量为33 kD.构建包含该基因全长的原核表达载体,进行原核表达,获得了分子量约53 kD的融合蛋白.将融合蛋白经腹腔注射免疫小鼠,制备出鼠抗RGV-12L血清.通过RT-PCR和Western blotting分析RGV感染细胞后RGV-12L的转录时序,感染4h可以在RNA水平检测到RGV-12L的转录,感染8h可以在蛋白水平检测到RGV-12L的表达.用DNA复制抑制剂阿糖胞苷(Arac)进行药物抑制实验,鉴定出RGV-12L是一个晚期基因.免疫荧光分析显示RGV-12L分布于感染细胞的细胞核和细胞质中,在病毒加工厂中也有该蛋白的分布,提示该基因可能与病毒的装配、释放有关.
從蛙虹綵病毒(Rana grylio virus,RGV)中剋隆齣一箇虹綵病毒科的序列保守基因RGV-12L,序列分析錶明該基因全長894 bp,編碼一箇含297箇氨基痠的多肽,分子量為33 kD.構建包含該基因全長的原覈錶達載體,進行原覈錶達,穫得瞭分子量約53 kD的融閤蛋白.將融閤蛋白經腹腔註射免疫小鼠,製備齣鼠抗RGV-12L血清.通過RT-PCR和Western blotting分析RGV感染細胞後RGV-12L的轉錄時序,感染4h可以在RNA水平檢測到RGV-12L的轉錄,感染8h可以在蛋白水平檢測到RGV-12L的錶達.用DNA複製抑製劑阿糖胞苷(Arac)進行藥物抑製實驗,鑒定齣RGV-12L是一箇晚期基因.免疫熒光分析顯示RGV-12L分佈于感染細胞的細胞覈和細胞質中,在病毒加工廠中也有該蛋白的分佈,提示該基因可能與病毒的裝配、釋放有關.
종와홍채병독(Rana grylio virus,RGV)중극륭출일개홍채병독과적서렬보수기인RGV-12L,서렬분석표명해기인전장894 bp,편마일개함297개안기산적다태,분자량위33 kD.구건포함해기인전장적원핵표체재체,진행원핵표체,획득료분자량약53 kD적융합단백.장융합단백경복강주사면역소서,제비출서항RGV-12L혈청.통과RT-PCR화Western blotting분석RGV감염세포후RGV-12L적전록시서,감염4h가이재RNA수평검측도RGV-12L적전록,감염8h가이재단백수평검측도RGV-12L적표체.용DNA복제억제제아당포감(Arac)진행약물억제실험,감정출RGV-12L시일개만기기인.면역형광분석현시RGV-12L분포우감염세포적세포핵화세포질중,재병독가공엄중야유해단백적분포,제시해기인가능여병독적장배、석방유관.
