反转录病毒介导的稳定表达HIV-1Gag蛋白和增强型绿色荧光蛋白细胞系的建立
반전록병독개도적은정표체HIV-1Gag단백화증강형록색형광단백세포계적건립
Continuously Expressing HIV-1 Gag and EGFP by Retroviral Vector Induced SP2/0 Cell Lines
  • 万方数据
    畜牧兽医学报 축목수의학보

    2011年 2期 203-209 ,共7页

    王婧%李昌%李林溪%胡博%丛艳昭%任大勇%王卓越%杜寿文%金宁一

    왕청%리창%리림계%호박%총염소%임대용%왕탁월%두수문%금저일

    反转录病毒载体%人免疫缺陷病毒%核心蛋白%增强型绿色荧光蛋白%小鼠骨髓瘤细胞SP2/0 反轉錄病毒載體%人免疫缺陷病毒%覈心蛋白%增彊型綠色熒光蛋白%小鼠骨髓瘤細胞SP2/0
    반전록병독재체%인면역결함병독%핵심단백%증강형록색형광단백%소서골수류세포SP2/0
    本研究旨在建立中国流行株人免疫缺陷病毒(HIV-1)衣壳蛋白(Gag)哺乳动物稳定表达细胞系.将HIV-1核心蛋白基因gag和增强型绿色荧光蛋白基因EGFP依次串联插入反转录病毒载体pFB-neo,构建重组反转录病毒载体pFB-gag-EGFP,并与含有辅助病毒gag-pol和env基因的质粒pVPack-GP、pVPack-10A1共转染HEK293T细胞,包装出的反转录病毒感染小鼠骨髓瘤细胞SP2/0.荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白EGFP表达,验证HIV-1核心蛋白Gag表达,G418抗性筛选阳性细胞.结果表明,HIV-1核心蛋白Gag和增强型绿色荧光蛋白可在SP2/0细胞中稳定表达,HIV-1核心蛋白gag基因稳定表达细胞系成功建立,为抗AIDS治疗用基因工程制剂及靶向药物的活性检测提供了理想方法.
    본연구지재건립중국류행주인면역결함병독(HIV-1)의각단백(Gag)포유동물은정표체세포계.장HIV-1핵심단백기인gag화증강형록색형광단백기인EGFP의차천련삽입반전록병독재체pFB-neo,구건중조반전록병독재체pFB-gag-EGFP,병여함유보조병독gag-pol화env기인적질립pVPack-GP、pVPack-10A1공전염HEK293T세포,포장출적반전록병독감염소서골수류세포SP2/0.형광현미경하관찰록색형광단백EGFP표체,험증HIV-1핵심단백Gag표체,G418항성사선양성세포.결과표명,HIV-1핵심단백Gag화증강형록색형광단백가재SP2/0세포중은정표체,HIV-1핵심단백gag기인은정표체세포계성공건립,위항AIDS치료용기인공정제제급파향약물적활성검측제공료이상방법.
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