医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2011年
4期
309-312
,共4页
王恬%陶涛%杨润峰%吴章颖%李伟%廖书杰%王世宣
王恬%陶濤%楊潤峰%吳章穎%李偉%廖書傑%王世宣
왕념%도도%양윤봉%오장영%리위%료서걸%왕세선
人grp78基因%载体构建%转染%基因表达
人grp78基因%載體構建%轉染%基因錶達
인grp78기인%재체구건%전염%기인표체
目的 构建人grp78基因真核表达载体,并建立稳定高表达grp78的人宫颈癌HeLa细胞系.方法 用RT-PCR方法从人宫颈癌HeLa细胞中扩增grp78基因编码区,将PCR产物克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1(+)/grp78并测序鉴定.用构建成功的pcDNA3.1(+)/grp78真核表达载体转染入人宫颈癌HeLa细胞,经G418筛选获得grp78稳定高表达的HeLa细胞系,并用RT-PCR及Western 印迹方法鉴定.结果 成功构建pcDNA3.1(+)/grp78真核表达载体,筛选获得稳定高表达人grp78的HeLa细胞系.结论 grp78真核表达载体的成功构建和稳定高表达grp78的HeLa细胞系的建立为进一步研究grp78的功能奠定了基础.
目的 構建人grp78基因真覈錶達載體,併建立穩定高錶達grp78的人宮頸癌HeLa細胞繫.方法 用RT-PCR方法從人宮頸癌HeLa細胞中擴增grp78基因編碼區,將PCR產物剋隆到pcDNA3.1(+)真覈錶達載體,構建重組質粒pcDNA3.1(+)/grp78併測序鑒定.用構建成功的pcDNA3.1(+)/grp78真覈錶達載體轉染入人宮頸癌HeLa細胞,經G418篩選穫得grp78穩定高錶達的HeLa細胞繫,併用RT-PCR及Western 印跡方法鑒定.結果 成功構建pcDNA3.1(+)/grp78真覈錶達載體,篩選穫得穩定高錶達人grp78的HeLa細胞繫.結論 grp78真覈錶達載體的成功構建和穩定高錶達grp78的HeLa細胞繫的建立為進一步研究grp78的功能奠定瞭基礎.
목적 구건인grp78기인진핵표체재체,병건립은정고표체grp78적인궁경암HeLa세포계.방법 용RT-PCR방법종인궁경암HeLa세포중확증grp78기인편마구,장PCR산물극륭도pcDNA3.1(+)진핵표체재체,구건중조질립pcDNA3.1(+)/grp78병측서감정.용구건성공적pcDNA3.1(+)/grp78진핵표체재체전염입인궁경암HeLa세포,경G418사선획득grp78은정고표체적HeLa세포계,병용RT-PCR급Western 인적방법감정.결과 성공구건pcDNA3.1(+)/grp78진핵표체재체,사선획득은정고표체인grp78적HeLa세포계.결론 grp78진핵표체재체적성공구건화은정고표체grp78적HeLa세포계적건립위진일보연구grp78적공능전정료기출.
