广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
11期
148-150,封3
,共4页
黄良宗%钟科阳%王淑敏%司兴奎%马春全%顾万军
黃良宗%鐘科暘%王淑敏%司興奎%馬春全%顧萬軍
황량종%종과양%왕숙민%사흥규%마춘전%고만군
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)%RNA干扰%病毒复制
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)%RNA榦擾%病毒複製
저번식여호흡종합정병독(PRRSV)%RNA간우%병독복제
根据siRNA设计原则,选取了PRRSV N基因上的保守序列作为可能的干扰位点,设计、合成了3个siRNAs,分别将其克隆到pSIREN-Shuttle中,获得3个siRNA重组表达质粒:pShuttle-NI,pShuttle-N2和pShuttle-N3.将siRNA重组表达质粒与融合表达质粒pEGFP-ORF7共转染Marc 145细胞,并通过荧光显微镜观察.结果显示,siRNA重组表达质粒能显著抑制PRRSV N基因的表达.在转染总剂量(0.7 μg/孔)固定的条件下.分别将不同组合的siRNA表达质粒共转染Marc 145细胞,各组合转染孔对PRRSV复制的抑制作用没有明显差异,其中3种siRNA表达质粒共转染对PRRSV复制的抑制最好,证实siRNA对病毒复制作用具有相加性.
根據siRNA設計原則,選取瞭PRRSV N基因上的保守序列作為可能的榦擾位點,設計、閤成瞭3箇siRNAs,分彆將其剋隆到pSIREN-Shuttle中,穫得3箇siRNA重組錶達質粒:pShuttle-NI,pShuttle-N2和pShuttle-N3.將siRNA重組錶達質粒與融閤錶達質粒pEGFP-ORF7共轉染Marc 145細胞,併通過熒光顯微鏡觀察.結果顯示,siRNA重組錶達質粒能顯著抑製PRRSV N基因的錶達.在轉染總劑量(0.7 μg/孔)固定的條件下.分彆將不同組閤的siRNA錶達質粒共轉染Marc 145細胞,各組閤轉染孔對PRRSV複製的抑製作用沒有明顯差異,其中3種siRNA錶達質粒共轉染對PRRSV複製的抑製最好,證實siRNA對病毒複製作用具有相加性.
근거siRNA설계원칙,선취료PRRSV N기인상적보수서렬작위가능적간우위점,설계、합성료3개siRNAs,분별장기극륭도pSIREN-Shuttle중,획득3개siRNA중조표체질립:pShuttle-NI,pShuttle-N2화pShuttle-N3.장siRNA중조표체질립여융합표체질립pEGFP-ORF7공전염Marc 145세포,병통과형광현미경관찰.결과현시,siRNA중조표체질립능현저억제PRRSV N기인적표체.재전염총제량(0.7 μg/공)고정적조건하.분별장불동조합적siRNA표체질립공전염Marc 145세포,각조합전염공대PRRSV복제적억제작용몰유명현차이,기중3충siRNA표체질립공전염대PRRSV복제적억제최호,증실siRNA대병독복제작용구유상가성.
