南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
2期
15-20
,共6页
原位杂交%水稻%固定液%消化时间%杂交液
原位雜交%水稻%固定液%消化時間%雜交液
원위잡교%수도%고정액%소화시간%잡교액
为了能准确、快捷地追踪目标基因在水稻中的表达,并提供在不同植物中基因表达的研究基础,优化了水稻RNA原位杂交体系.以卡诺固定液处理材料,原位杂交结果显示:细胞边界清楚,标本背景清晰,检测信号强.设置了0、15、25、35和45 min 5个消化时间梯度,消化时间是25 min的试验结果显示:杂交信号分布于整个受检表面,信号可检测性强,并在不同组织结构中信号强弱不同.以根尖为材料,杂交液A的检测信号符合分布规律,杂交液B验证反义探针检测信号较弱,杂交液C验证反义探针检测信号进一步减弱,并伴随着验证正义探针信号增强.以叶片为试验材料,杂交液A和B的原位杂交结果差异不大,而杂交液C验证反义探针信号减弱,验证正义探针信号增强.结论:水稻RNA原位杂交体系的固定液为卡诺固定液,最佳消化时间为25 min,杂交液为杂交液A.
為瞭能準確、快捷地追蹤目標基因在水稻中的錶達,併提供在不同植物中基因錶達的研究基礎,優化瞭水稻RNA原位雜交體繫.以卡諾固定液處理材料,原位雜交結果顯示:細胞邊界清楚,標本揹景清晰,檢測信號彊.設置瞭0、15、25、35和45 min 5箇消化時間梯度,消化時間是25 min的試驗結果顯示:雜交信號分佈于整箇受檢錶麵,信號可檢測性彊,併在不同組織結構中信號彊弱不同.以根尖為材料,雜交液A的檢測信號符閤分佈規律,雜交液B驗證反義探針檢測信號較弱,雜交液C驗證反義探針檢測信號進一步減弱,併伴隨著驗證正義探針信號增彊.以葉片為試驗材料,雜交液A和B的原位雜交結果差異不大,而雜交液C驗證反義探針信號減弱,驗證正義探針信號增彊.結論:水稻RNA原位雜交體繫的固定液為卡諾固定液,最佳消化時間為25 min,雜交液為雜交液A.
위료능준학、쾌첩지추종목표기인재수도중적표체,병제공재불동식물중기인표체적연구기출,우화료수도RNA원위잡교체계.이잡낙고정액처리재료,원위잡교결과현시:세포변계청초,표본배경청석,검측신호강.설치료0、15、25、35화45 min 5개소화시간제도,소화시간시25 min적시험결과현시:잡교신호분포우정개수검표면,신호가검측성강,병재불동조직결구중신호강약불동.이근첨위재료,잡교액A적검측신호부합분포규률,잡교액B험증반의탐침검측신호교약,잡교액C험증반의탐침검측신호진일보감약,병반수착험증정의탐침신호증강.이협편위시험재료,잡교액A화B적원위잡교결과차이불대,이잡교액C험증반의탐침신호감약,험증정의탐침신호증강.결론:수도RNA원위잡교체계적고정액위잡낙고정액,최가소화시간위25 min,잡교액위잡교액A.