第一军医大学学报
第一軍醫大學學報
제일군의대학학보
JOURNAL OF FIRST MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2004年
8期
869-872
,共4页
彭鸿娟%陈晓光%周晓红%沈树满
彭鴻娟%陳曉光%週曉紅%瀋樹滿
팽홍연%진효광%주효홍%침수만
日本血吸虫%钙结合蛋白%启动子区%基因文库%外显子%内含子
日本血吸蟲%鈣結閤蛋白%啟動子區%基因文庫%外顯子%內含子
일본혈흡충%개결합단백%계동자구%기인문고%외현자%내함자
目的克隆日本血吸虫8k CaBP(Sj8CaBP)基因启动子区并对该序列进行分析.方法提取日本血吸虫基因组DNA,并按ClontechUniversal Genome WalkerTM Kit的操作手册说明,建立日本血吸虫基因组DNA文库.根据手册要求及Sj8CaBP基因的cDNA序列,设计合成该基因染色体步移的特异性引物与试剂盒提供的端子引物进行巢式PCR.将得到的PCR产物克隆测序,测序结果用启动子区的分析软件及与其cDNA序列比对进行分析.结果得到的Sj8CaBP基因长度为1 079 bp(GenBank登录号AY262018),该基因包含Sj8CaBP基因完整的开放阅读框(ORF),包括1个内含子及2个外显子,在其5'端UTR区具有明显的启动子区,包括TATA盒及CAAT盒,没有发现GC盒及一些血吸虫基因启动子区所常见的AP-1(Active protein 1)结合位点.结论从日本血吸虫基因组文库中获得一个长1 079bp的Sj8CaBP基因片段(GenBank登录号为AY262018),经分析证明,该片段包含一个启动子区,具有TATA盒及CAAT盒的结构及1个内含子2个外显子.
目的剋隆日本血吸蟲8k CaBP(Sj8CaBP)基因啟動子區併對該序列進行分析.方法提取日本血吸蟲基因組DNA,併按ClontechUniversal Genome WalkerTM Kit的操作手冊說明,建立日本血吸蟲基因組DNA文庫.根據手冊要求及Sj8CaBP基因的cDNA序列,設計閤成該基因染色體步移的特異性引物與試劑盒提供的耑子引物進行巢式PCR.將得到的PCR產物剋隆測序,測序結果用啟動子區的分析軟件及與其cDNA序列比對進行分析.結果得到的Sj8CaBP基因長度為1 079 bp(GenBank登錄號AY262018),該基因包含Sj8CaBP基因完整的開放閱讀框(ORF),包括1箇內含子及2箇外顯子,在其5'耑UTR區具有明顯的啟動子區,包括TATA盒及CAAT盒,沒有髮現GC盒及一些血吸蟲基因啟動子區所常見的AP-1(Active protein 1)結閤位點.結論從日本血吸蟲基因組文庫中穫得一箇長1 079bp的Sj8CaBP基因片段(GenBank登錄號為AY262018),經分析證明,該片段包含一箇啟動子區,具有TATA盒及CAAT盒的結構及1箇內含子2箇外顯子.
목적극륭일본혈흡충8k CaBP(Sj8CaBP)기인계동자구병대해서렬진행분석.방법제취일본혈흡충기인조DNA,병안ClontechUniversal Genome WalkerTM Kit적조작수책설명,건립일본혈흡충기인조DNA문고.근거수책요구급Sj8CaBP기인적cDNA서렬,설계합성해기인염색체보이적특이성인물여시제합제공적단자인물진행소식PCR.장득도적PCR산물극륭측서,측서결과용계동자구적분석연건급여기cDNA서렬비대진행분석.결과득도적Sj8CaBP기인장도위1 079 bp(GenBank등록호AY262018),해기인포함Sj8CaBP기인완정적개방열독광(ORF),포괄1개내함자급2개외현자,재기5'단UTR구구유명현적계동자구,포괄TATA합급CAAT합,몰유발현GC합급일사혈흡충기인계동자구소상견적AP-1(Active protein 1)결합위점.결론종일본혈흡충기인조문고중획득일개장1 079bp적Sj8CaBP기인편단(GenBank등록호위AY262018),경분석증명,해편단포함일개계동자구,구유TATA합급CAAT합적결구급1개내함자2개외현자.