人骨保护素基因重组腺病毒的构建及鉴定
인골보호소기인중조선병독적구건급감정
Construction and identification of human osteoprotegerin (hOPG) gene recombinant adenovirus
  • 万方数据
    中国骨质疏松杂志 중국골질소송잡지
    CHINESE JOURNAL OF OSTEOPOROSIS
    2005年 2期 167-170 ,共4页

    王晓军%王爱民%张忠荣%吴思宇%郭庆山%吴军%贺伟峰%汤守营%张全顺

    왕효군%왕애민%장충영%오사우%곽경산%오군%하위봉%탕수영%장전순

    骨保护素%腺病毒%同源重组%基因治疗 骨保護素%腺病毒%同源重組%基因治療
    골보호소%선병독%동원중조%기인치료
    目的构建人骨保护素(hOPG)基因的重组腺病毒载体并检测其转染能力.方法采用基因工程技术,将hOPG基因片段插入到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上,利用PadEasy系统与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183胞内进行同源重组,经293细胞包装、扩增,得到携带hOPG基因的重组腺病毒AdEasy-PAdtrack-CMV-hOPG,将重组腺病毒AdhOPG对大鼠骨髓基质细胞(rMSCs)进行感染.采用PCR方法对重组腺病毒载体进行鉴定,利用绿色荧光报告基因转染结果,以荧光计数法检测重组腺病毒的滴度.结果酶切鉴定及PCR结果证明hOPG基因重组腺病毒载体成功,病毒滴度可达2.5×109pfu/ml,具有很强感染能力,结论应用细菌内同源重组法,成功构建了含hOPG重组腺病毒载体.
    목적구건인골보호소(hOPG)기인적중조선병독재체병검측기전염능력.방법채용기인공정기술,장hOPG기인편단삽입도선병독재체질립pAdTrack-CMV상,이용PadEasy계통여골가질립재대장간균BJ5183포내진행동원중조,경293세포포장、확증,득도휴대hOPG기인적중조선병독AdEasy-PAdtrack-CMV-hOPG,장중조선병독AdhOPG대대서골수기질세포(rMSCs)진행감염.채용PCR방법대중조선병독재체진행감정,이용록색형광보고기인전염결과,이형광계수법검측중조선병독적적도.결과매절감정급PCR결과증명hOPG기인중조선병독재체성공,병독적도가체2.5×109pfu/ml,구유흔강감염능력,결론응용세균내동원중조법,성공구건료함hOPG중조선병독재체.
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