禽流感H5、H7、H9亚型多重实时荧光RT-PCR检测试剂盒灵敏性试验
금류감H5、H7、H9아형다중실시형광RT-PCR검측시제합령민성시험
Sensitive test of the multiplex real-time reverse transcriptase PCR kit for the rapid detection of subtype H5, H7 and H9 avian influenza virus
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2006年 3期 336-340 ,共5页

    秦智锋%吕建强%肖性龙%张东林%李环玲%陈书琨%钟安清%黄运生%林庆燕%林镜中%刘胜利

    진지봉%려건강%초성룡%장동림%리배령%진서곤%종안청%황운생%림경연%림경중%류성리

    禽流感病毒%鸡胚半数致死量%多重实时荧光RT-PCR 禽流感病毒%鷄胚半數緻死量%多重實時熒光RT-PCR
    금류감병독%계배반수치사량%다중실시형광RT-PCR
    为了确定深圳出入境检验检疫局和深圳太太基因工程有限公司联合研制的禽流感H5、H7、H9亚型多重实时荧光RT-PCR检测试剂盒对H5和H9亚型禽流感的灵敏度,通过测定已知鸡胚半数致死量(ELD50)的标准毒株的进行了定量.利用9～11日龄SPF鸡胚,对深圳出入境检验检疫局保存的H5和H9亚型标准禽流感毒株进行了鸡胚半数致死量(ELD50)的测定,结果为H5亚型禽流感毒株的半数致死量为10-7 75/0.2 mL,H9亚型禽流感毒株的半数致死量为10-8.5/0.2 mL.用所研制的禽流感H5、H7、H9亚型多重实时荧光RT-PCR检测试剂盒对H5和H9亚型标准禽流感毒株原液进行10倍连续稀释,进行实时荧光RT-PCR灵敏度的测定,结果发现:试剂盒检测H5亚型标准禽流感毒株的灵敏度为标准毒株10-5倍稀释液,该稀释液含有281 ELD50病毒量;检测H9亚型标准禽流感毒株的灵敏度为标准毒株10-8倍稀释液,该稀释液含有15.8 ELD50病毒量.同时检测H5和H9时,试剂盒的灵敏度要比单独检测一个亚型时的灵敏度增加一个数量级.本灵敏度已经能够检测到感染鸡的喉拭子和(或)泄殖腔拭子所采集的病毒量,能够满足检验检疫的实际需要.
    위료학정심수출입경검험검역국화심수태태기인공정유한공사연합연제적금류감H5、H7、H9아형다중실시형광RT-PCR검측시제합대H5화H9아형금류감적령민도,통과측정이지계배반수치사량(ELD50)적표준독주적진행료정량.이용9～11일령SPF계배,대심수출입경검험검역국보존적H5화H9아형표준금류감독주진행료계배반수치사량(ELD50)적측정,결과위H5아형금류감독주적반수치사량위10-7 75/0.2 mL,H9아형금류감독주적반수치사량위10-8.5/0.2 mL.용소연제적금류감H5、H7、H9아형다중실시형광RT-PCR검측시제합대H5화H9아형표준금류감독주원액진행10배련속희석,진행실시형광RT-PCR령민도적측정,결과발현:시제합검측H5아형표준금류감독주적령민도위표준독주10-5배희석액,해희석액함유281 ELD50병독량;검측H9아형표준금류감독주적령민도위표준독주10-8배희석액,해희석액함유15.8 ELD50병독량.동시검측H5화H9시,시제합적령민도요비단독검측일개아형시적령민도증가일개수량급.본령민도이경능구검측도감염계적후식자화(혹)설식강식자소채집적병독량,능구만족검험검역적실제수요.
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