中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2007年
14期
2695-2698
,共4页
盛俊东%刘兴炎%白孟海%葛宝丰
盛俊東%劉興炎%白孟海%葛寶豐
성준동%류흥염%백맹해%갈보봉
血管内皮生长因子类%骨形态发生蛋白质类%骨质疏松%腰椎
血管內皮生長因子類%骨形態髮生蛋白質類%骨質疏鬆%腰椎
혈관내피생장인자류%골형태발생단백질류%골질소송%요추
目的:观察骨质疏松性椎体骨折愈合过程中,局部血管内皮生长因子动态表达,探讨牛骨形态发生蛋白促进SD大鼠骨质疏松性椎体骨折愈合的作用机制.方法:实验于2005-07/2006-07在解放军兰州军区总医院骨研所完成.①牛骨形态发生蛋白的制备:青海小牦牛大腿骨,-4℃条件下,粉碎,按Urist改良方法提取.②选择雌性SPF级8个月龄SD大鼠96只,去除双侧卵巢建立骨质疏松模型.随机分为2组:实验组和对照组,每组48只.③术后3个月行Ls椎体开窗建立人工骨折模型,实验组置牛骨形态发生蛋白10 mg+纤维蛋白复合体;对照组注入等量无血清培养液.④于手术后3,7,10,14,21,28,56,84 d每组麻醉状态处死6只,用苏木精-伊红染色、免疫组织化学及定量聚合酶链反应检测骨折愈合不同时间的标本血管内皮生长因子及血管内皮生长因子mRNA的动态表达,阳性信号为胞浆内棕色颗粒.结果:96只SD大鼠全部进入结果分析.①骨折愈合不同时间组织学观察:实验组术后7 d纤维骨痂形成,21 d新生骨组织与旧骨组织出现融合,56～84 d软骨性骨痂已逐渐被骨性骨痂取代,骨折部位髓腔再通,出现成熟板层骨,骨折基本愈合.对照组术后7 d未见典型纤维性骨痂;21 d新生骨组织大都游离与孤立存在,术后28 d骨小梁仅有少部分连结成网状,56～84 d部分骨缺损存在,不见成熟板层骨,大部分髓腔不通,骨折愈合延迟.②骨折不同时间血管内皮生长因子免疫组织化学结果:实验组血管内皮生长因子在7 d左右可见有阳性表达的细胞,14 d有分泌高峰,对应循环数(CT值)最小,两组比值最大.而对照组未见明显分泌高峰.③实时荧光定量聚合酶链反应检测结果:对照组在造模后1,2,4,6,8周时,椎体内的血管内皮生长因子mRNA的表达量明显低于实验组(P＜0.01).结论:牛骨形态发生蛋白可促进大鼠骨质疏松性椎体骨折部位血管内皮生长因子的动态表达,可在受体骨折部位局部促进骨折生长.
目的:觀察骨質疏鬆性椎體骨摺愈閤過程中,跼部血管內皮生長因子動態錶達,探討牛骨形態髮生蛋白促進SD大鼠骨質疏鬆性椎體骨摺愈閤的作用機製.方法:實驗于2005-07/2006-07在解放軍蘭州軍區總醫院骨研所完成.①牛骨形態髮生蛋白的製備:青海小牦牛大腿骨,-4℃條件下,粉碎,按Urist改良方法提取.②選擇雌性SPF級8箇月齡SD大鼠96隻,去除雙側卵巢建立骨質疏鬆模型.隨機分為2組:實驗組和對照組,每組48隻.③術後3箇月行Ls椎體開窗建立人工骨摺模型,實驗組置牛骨形態髮生蛋白10 mg+纖維蛋白複閤體;對照組註入等量無血清培養液.④于手術後3,7,10,14,21,28,56,84 d每組痳醉狀態處死6隻,用囌木精-伊紅染色、免疫組織化學及定量聚閤酶鏈反應檢測骨摺愈閤不同時間的標本血管內皮生長因子及血管內皮生長因子mRNA的動態錶達,暘性信號為胞漿內棕色顆粒.結果:96隻SD大鼠全部進入結果分析.①骨摺愈閤不同時間組織學觀察:實驗組術後7 d纖維骨痂形成,21 d新生骨組織與舊骨組織齣現融閤,56～84 d軟骨性骨痂已逐漸被骨性骨痂取代,骨摺部位髓腔再通,齣現成熟闆層骨,骨摺基本愈閤.對照組術後7 d未見典型纖維性骨痂;21 d新生骨組織大都遊離與孤立存在,術後28 d骨小樑僅有少部分連結成網狀,56～84 d部分骨缺損存在,不見成熟闆層骨,大部分髓腔不通,骨摺愈閤延遲.②骨摺不同時間血管內皮生長因子免疫組織化學結果:實驗組血管內皮生長因子在7 d左右可見有暘性錶達的細胞,14 d有分泌高峰,對應循環數(CT值)最小,兩組比值最大.而對照組未見明顯分泌高峰.③實時熒光定量聚閤酶鏈反應檢測結果:對照組在造模後1,2,4,6,8週時,椎體內的血管內皮生長因子mRNA的錶達量明顯低于實驗組(P＜0.01).結論:牛骨形態髮生蛋白可促進大鼠骨質疏鬆性椎體骨摺部位血管內皮生長因子的動態錶達,可在受體骨摺部位跼部促進骨摺生長.
목적:관찰골질소송성추체골절유합과정중,국부혈관내피생장인자동태표체,탐토우골형태발생단백촉진SD대서골질소송성추체골절유합적작용궤제.방법:실험우2005-07/2006-07재해방군란주군구총의원골연소완성.①우골형태발생단백적제비:청해소모우대퇴골,-4℃조건하,분쇄,안Urist개량방법제취.②선택자성SPF급8개월령SD대서96지,거제쌍측란소건립골질소송모형.수궤분위2조:실험조화대조조,매조48지.③술후3개월행Ls추체개창건립인공골절모형,실험조치우골형태발생단백10 mg+섬유단백복합체;대조조주입등량무혈청배양액.④우수술후3,7,10,14,21,28,56,84 d매조마취상태처사6지,용소목정-이홍염색、면역조직화학급정량취합매련반응검측골절유합불동시간적표본혈관내피생장인자급혈관내피생장인자mRNA적동태표체,양성신호위포장내종색과립.결과:96지SD대서전부진입결과분석.①골절유합불동시간조직학관찰:실험조술후7 d섬유골가형성,21 d신생골조직여구골조직출현융합,56～84 d연골성골가이축점피골성골가취대,골절부위수강재통,출현성숙판층골,골절기본유합.대조조술후7 d미견전형섬유성골가;21 d신생골조직대도유리여고립존재,술후28 d골소량부유소부분련결성망상,56～84 d부분골결손존재,불견성숙판층골,대부분수강불통,골절유합연지.②골절불동시간혈관내피생장인자면역조직화학결과:실험조혈관내피생장인자재7 d좌우가견유양성표체적세포,14 d유분비고봉,대응순배수(CT치)최소,량조비치최대.이대조조미견명현분비고봉.③실시형광정량취합매련반응검측결과:대조조재조모후1,2,4,6,8주시,추체내적혈관내피생장인자mRNA적표체량명현저우실험조(P＜0.01).결론:우골형태발생단백가촉진대서골질소송성추체골절부위혈관내피생장인자적동태표체,가재수체골절부위국부촉진골절생장.
