高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白Nsp4的表达及其抗血清的制备
고치병성저번식여호흡종합정병독비결구단백Nsp4적표체급기항혈청적제비
PROKARYOTIC EXPRESSION OF NONSTRUCTURAL PROTEIN 4 (NSP4) OF HIGHLY PATHOGENIC PORCINE REPRODUCTIVE AND RESPIRATORY SYNDROME VIRUS AND CHARACTERIZATION OFANTI-NSP4 POLYCLONAL ANTIBODY
  • 万方数据
    中国动物传染病学报 중국동물전염병학보
    CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
    2009年 3期 21-26 ,共6页

    许傲天%周艳君%李国新%于海%闫丽萍%陈宗艳%张善瑞%王礞礞%姜一峰%王亚欣%田志军%童光志

    허오천%주염군%리국신%우해%염려평%진종염%장선서%왕몽몽%강일봉%왕아흔%전지군%동광지

    高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒%Nsp4%原核表达%多抗血清 高緻病性豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%Nsp4%原覈錶達%多抗血清
    고치병성저번식여호흡종합정병독%Nsp4%원핵표체%다항혈청
    根据GenBank中已发表的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Highly Pathogemc Porcine Reproductiveand Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)HuN4株全基因组序列,设计合成一对引物,对PRRSV HuN4株非结构蛋白Nsp4(Nonstructural protein 4基因进行RT-PCR扩增,克隆到原核表达载体pET30a(+)中,构建重组表达载体pET30a-Nsp4,经酶切测序鉴定.将pET30a-Nsp4转化表达菌株BL21(DE3),诱导可表达分子量约为27 kDa重组蛋白.Western blot显示其具有较好的反应原性,经镍离子亲和层析(Ni-NTA)纯化获得了高纯度的可溶性重组蛋白.将纯化的Nsp4蛋白免疫BALB/c小鼠,抗血清ELISA效价达1:16 000,Western blot和IFA表明,所制备的抗血清能够特异性识别PRRSV自身表达的Nsp4蛋白.本研究获得了可溶性的PRRSV Nsp4蛋白,制备了Nsp4特异性多抗血清,为进一步研究Nsp4蛋白的亚细胞定位及功能奠定了基础.
    근거GenBank중이발표적고치병성저번식여호흡종합정병독(Highly Pathogemc Porcine Reproductiveand Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)HuN4주전기인조서렬,설계합성일대인물,대PRRSV HuN4주비결구단백Nsp4(Nonstructural protein 4기인진행RT-PCR확증,극륭도원핵표체재체pET30a(+)중,구건중조표체재체pET30a-Nsp4,경매절측서감정.장pET30a-Nsp4전화표체균주BL21(DE3),유도가표체분자량약위27 kDa중조단백.Western blot현시기구유교호적반응원성,경얼리자친화층석(Ni-NTA)순화획득료고순도적가용성중조단백.장순화적Nsp4단백면역BALB/c소서,항혈청ELISA효개체1:16 000,Western blot화IFA표명,소제비적항혈청능구특이성식별PRRSV자신표체적Nsp4단백.본연구획득료가용성적PRRSV Nsp4단백,제비료Nsp4특이성다항혈청,위진일보연구Nsp4단백적아세포정위급공능전정료기출.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문