东南大学学报（医学版）
東南大學學報（醫學版）
동남대학학보（의학판）
JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2011年
6期
827-831
,共5页
陈朝婷%高峰%陆平%蔡文玮%盛净
陳朝婷%高峰%陸平%蔡文瑋%盛淨
진조정%고봉%륙평%채문위%성정
基因载体%磁性壳聚糖%内皮型一氧化氮合酶基因%血管平滑肌细胞
基因載體%磁性殼聚糖%內皮型一氧化氮閤酶基因%血管平滑肌細胞
기인재체%자성각취당%내피형일양화담합매기인%혈관평활기세포
目的:探讨磁性壳聚糖(后简称磁聚糖)纳米载体对血管平滑肌细胞的毒性及介导内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因对受损血管平滑肌细胞的转染效率、表达及对细胞增生的影响.方法:原位共沉淀法制备磁聚糖并耦合eNOS质粒;MTT法检测磁聚糖对血管平滑肌细胞生长的毒性;分别以重组腺病毒表达载体(AdCMV-eNOS)、磁聚糖-eNOS和磁聚糖空载体在外加磁场下转染受损血管平滑肌细胞,免疫荧光染色及RT-PCR测定eNOS表达,流式细胞术检测转染效率及血管平滑肌细胞周期和凋亡情况.结果:在浓度低于20 mg·ml-1时,磁聚糖对血管平滑肌细胞的生长无明显毒副作用;磁聚糖-eNOS组转染效率[(58-7±3-6)%]较AdCMV-eNOS组[(78-1±2-5)%]低,但两组均检测到eNOS mRNA和蛋白表达,且两组受损血管平滑肌细胞 G0/G1期细胞较磁聚糖空载体组明显增多(P<0-01),S/G2-M期细胞减少(P<0-01),3组的细胞凋亡无显著差异(P>0-05).结论:正常浓度的磁聚糖对血管平滑肌细胞生长无抑制作用,该载体能成功介导eNOS基因的转染,延缓受损后血管平滑肌细胞增生周期.
目的:探討磁性殼聚糖(後簡稱磁聚糖)納米載體對血管平滑肌細胞的毒性及介導內皮型一氧化氮閤酶(eNOS)基因對受損血管平滑肌細胞的轉染效率、錶達及對細胞增生的影響.方法:原位共沉澱法製備磁聚糖併耦閤eNOS質粒;MTT法檢測磁聚糖對血管平滑肌細胞生長的毒性;分彆以重組腺病毒錶達載體(AdCMV-eNOS)、磁聚糖-eNOS和磁聚糖空載體在外加磁場下轉染受損血管平滑肌細胞,免疫熒光染色及RT-PCR測定eNOS錶達,流式細胞術檢測轉染效率及血管平滑肌細胞週期和凋亡情況.結果:在濃度低于20 mg·ml-1時,磁聚糖對血管平滑肌細胞的生長無明顯毒副作用;磁聚糖-eNOS組轉染效率[(58-7±3-6)%]較AdCMV-eNOS組[(78-1±2-5)%]低,但兩組均檢測到eNOS mRNA和蛋白錶達,且兩組受損血管平滑肌細胞 G0/G1期細胞較磁聚糖空載體組明顯增多(P<0-01),S/G2-M期細胞減少(P<0-01),3組的細胞凋亡無顯著差異(P>0-05).結論:正常濃度的磁聚糖對血管平滑肌細胞生長無抑製作用,該載體能成功介導eNOS基因的轉染,延緩受損後血管平滑肌細胞增生週期.
목적:탐토자성각취당(후간칭자취당)납미재체대혈관평활기세포적독성급개도내피형일양화담합매(eNOS)기인대수손혈관평활기세포적전염효솔、표체급대세포증생적영향.방법:원위공침정법제비자취당병우합eNOS질립;MTT법검측자취당대혈관평활기세포생장적독성;분별이중조선병독표체재체(AdCMV-eNOS)、자취당-eNOS화자취당공재체재외가자장하전염수손혈관평활기세포,면역형광염색급RT-PCR측정eNOS표체,류식세포술검측전염효솔급혈관평활기세포주기화조망정황.결과:재농도저우20 mg·ml-1시,자취당대혈관평활기세포적생장무명현독부작용;자취당-eNOS조전염효솔[(58-7±3-6)%]교AdCMV-eNOS조[(78-1±2-5)%]저,단량조균검측도eNOS mRNA화단백표체,차량조수손혈관평활기세포 G0/G1기세포교자취당공재체조명현증다(P<0-01),S/G2-M기세포감소(P<0-01),3조적세포조망무현저차이(P>0-05).결론:정상농도적자취당대혈관평활기세포생장무억제작용,해재체능성공개도eNOS기인적전염,연완수손후혈관평활기세포증생주기.
