安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
10期
5800-5802,5807
,共4页
王菲%杜欣军%张荣%徐桂香%王硕
王菲%杜訢軍%張榮%徐桂香%王碩
왕비%두흔군%장영%서계향%왕석
转座子%拷贝数%实时定量PCR%阪崎克罗诺杆菌
轉座子%拷貝數%實時定量PCR%阪崎剋囉諾桿菌
전좌자%고패수%실시정량PCR%판기극라낙간균
[目的]建立检测阪崎克罗诺杆菌中转座子拷贝数的实时定量PCR方法.[方法]以单拷贝持家基因atpD作为内参基因,建立同时含有单拷贝持家基因atpD和EZ-TN5转座子的重组质粒；建立atpD基因与EZ-TN5转座子实时定量检测的标准曲线,并利用所建立的标准曲线,对3株阪崎肠杆菌突变株中atpD基因和EZ-TN5转座子的拷贝数进行检测,并计算其比值.[结果]atpD基因与EZ-TN5转座子实时定量检测标准曲线的相关系数分别为0.999和0.998;3株突变株中atpD基因和EZ-TN5转座子拷贝数比值分别为0.98、1.17与0.91,证明突变株中转座子为单拷贝.[结论]该研究所建立的实时定量PCR方法实用性强,可替代Southern杂交用于不同细菌中EZ-TN5转座子拷贝数的检测.
[目的]建立檢測阪崎剋囉諾桿菌中轉座子拷貝數的實時定量PCR方法.[方法]以單拷貝持傢基因atpD作為內參基因,建立同時含有單拷貝持傢基因atpD和EZ-TN5轉座子的重組質粒；建立atpD基因與EZ-TN5轉座子實時定量檢測的標準麯線,併利用所建立的標準麯線,對3株阪崎腸桿菌突變株中atpD基因和EZ-TN5轉座子的拷貝數進行檢測,併計算其比值.[結果]atpD基因與EZ-TN5轉座子實時定量檢測標準麯線的相關繫數分彆為0.999和0.998;3株突變株中atpD基因和EZ-TN5轉座子拷貝數比值分彆為0.98、1.17與0.91,證明突變株中轉座子為單拷貝.[結論]該研究所建立的實時定量PCR方法實用性彊,可替代Southern雜交用于不同細菌中EZ-TN5轉座子拷貝數的檢測.
[목적]건립검측판기극라낙간균중전좌자고패수적실시정량PCR방법.[방법]이단고패지가기인atpD작위내삼기인,건립동시함유단고패지가기인atpD화EZ-TN5전좌자적중조질립；건립atpD기인여EZ-TN5전좌자실시정량검측적표준곡선,병이용소건립적표준곡선,대3주판기장간균돌변주중atpD기인화EZ-TN5전좌자적고패수진행검측,병계산기비치.[결과]atpD기인여EZ-TN5전좌자실시정량검측표준곡선적상관계수분별위0.999화0.998;3주돌변주중atpD기인화EZ-TN5전좌자고패수비치분별위0.98、1.17여0.91,증명돌변주중전좌자위단고패.[결론]해연구소건립적실시정량PCR방법실용성강,가체대Southern잡교용우불동세균중EZ-TN5전좌자고패수적검측.
