生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2012年
2期
211-214
,共4页
郑文芝%张骞%魏建民%薛鹏浩%王翔%赵智慧%郑丽舒
鄭文芝%張鶱%魏建民%薛鵬浩%王翔%趙智慧%鄭麗舒
정문지%장건%위건민%설붕호%왕상%조지혜%정려서
呼吸道合胞病毒%TaqMan探针%实时定量RT-PCR
呼吸道閤胞病毒%TaqMan探針%實時定量RT-PCR
호흡도합포병독%TaqMan탐침%실시정량RT-PCR
目的:建立呼吸道合胞病毒(RSV)核酸特异、快速、敏感的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,并对临床样本进行检测.方法:比对编码RSV非编码蛋白的基因序列,选取其保守片段设计引物和探针,建立实时荧光定量RT-PCR检测方法,并与传统RT-PCR方法进行比较,分别对两者的灵敏性、特异性、重复性及临床样本检验的适用性进行评价.结果:所建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法可用于RSV的特异性检测.相对于传统RT-PCR方法100拷贝/反应的检测灵敏度,实时荧光定量RT-PCR的检测灵敏度达到10拷贝/反应,检测范围为1010～101拷贝/反应,且具有良好的特异性和重复性.从169份临床呼吸道标本中检出RSV阳性40例,高于普通PCR方法(31/169).结论:建立了RSV的TaqMan探针实时定量PCR检测方法,并可用于临床鼻咽拭子样本的检测,在临床上具有较好的应用前景.
目的:建立呼吸道閤胞病毒(RSV)覈痠特異、快速、敏感的TaqMan探針實時熒光定量PCR檢測方法,併對臨床樣本進行檢測.方法:比對編碼RSV非編碼蛋白的基因序列,選取其保守片段設計引物和探針,建立實時熒光定量RT-PCR檢測方法,併與傳統RT-PCR方法進行比較,分彆對兩者的靈敏性、特異性、重複性及臨床樣本檢驗的適用性進行評價.結果:所建立的實時熒光定量RT-PCR檢測方法可用于RSV的特異性檢測.相對于傳統RT-PCR方法100拷貝/反應的檢測靈敏度,實時熒光定量RT-PCR的檢測靈敏度達到10拷貝/反應,檢測範圍為1010～101拷貝/反應,且具有良好的特異性和重複性.從169份臨床呼吸道標本中檢齣RSV暘性40例,高于普通PCR方法(31/169).結論:建立瞭RSV的TaqMan探針實時定量PCR檢測方法,併可用于臨床鼻嚥拭子樣本的檢測,在臨床上具有較好的應用前景.
목적:건립호흡도합포병독(RSV)핵산특이、쾌속、민감적TaqMan탐침실시형광정량PCR검측방법,병대림상양본진행검측.방법:비대편마RSV비편마단백적기인서렬,선취기보수편단설계인물화탐침,건립실시형광정량RT-PCR검측방법,병여전통RT-PCR방법진행비교,분별대량자적령민성、특이성、중복성급림상양본검험적괄용성진행평개.결과:소건립적실시형광정량RT-PCR검측방법가용우RSV적특이성검측.상대우전통RT-PCR방법100고패/반응적검측령민도,실시형광정량RT-PCR적검측령민도체도10고패/반응,검측범위위1010～101고패/반응,차구유량호적특이성화중복성.종169빈림상호흡도표본중검출RSV양성40례,고우보통PCR방법(31/169).결론:건립료RSV적TaqMan탐침실시정량PCR검측방법,병가용우림상비인식자양본적검측,재림상상구유교호적응용전경.
